2024届高三生物一轮复习课件：微生物的培养技术及应用

第45讲 微生物的培养技术及应用 微生物的基本培养技术 培养基 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配置出供其生长繁殖的营养物质 分类 按物理性质分 按功能用途分 液体培养基 固体培养基 选择培养基 鉴别培养基 用于扩大培养 用于微生物分离、鉴别、活菌计数、菌种保藏 成分 水 无机盐 碳源 调节PH的物质 氮源 特殊营养物质 O2 用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累微生物或积累代谢产物 无菌技术 消毒 灭菌 微生物的基本培养技术 培养基 成分 水 无机盐 碳源 调节PH的物质 氮源 特殊营养物质 O2 无菌技术 消毒 灭菌 煮沸消毒法 巴氏消毒法 化学药物消毒法 紫外线消毒法 日常食品、器具 不耐高温的液体 表面消毒 空间消毒 灼烧灭菌 干热灭菌 湿热灭菌 接种工具、其他金属用具 玻璃器皿、金属用具 高压蒸汽灭菌 培养基及容器 纯培养 微生物的基本培养技术 培养基 成分 水 无机盐 碳源 调节PH的物质 氮源 特殊营养物质 O2 无菌技术 消毒 灭菌 纯培养 概念 纯培养物 纯培养 培养物 由单一个体繁殖所获得微生物群体 获得纯培养物的过程 培养基上培养出来的微生物群体 酵母菌纯培养 制备培养基 接种和分离 培养 结果分析与评价 灭菌 配制培养基 倒平板 称取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000ml，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20g葡萄糖、15-20g琼脂，用蒸馏水定容至1000ml。 将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力为100kPa、温度为121℃的条件下，灭菌15-30min。将5-8套培养皿包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160-170℃灭菌2h。 制备培养基 灭菌 配制培养基 制备培养基 倒平板 待培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。 (1)培养基要冷却到50 ℃左右时开始倒平板。温度过高会烫手，过低培养基又会凝固。 (2)要使锥形瓶的瓶口通过酒精灯火焰。通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 (3)倒平板时，要用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，不要完全打开，以免杂菌污染培养基。 (4)平板冷凝后，要将平板倒置。因为平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，平板倒置后，既可避免培养基表面的水分过快地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。　　　 名师解读 接种和分离 ①灼烧接种环，直至接种环金属丝烧红 ②在火焰旁冷却接种环，拔出酵母菌培养液试管的棉塞 ④在火焰附近用接种环蘸取一环菌液 ⑥将皿盖打开一条缝隙，将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划3-5条平行线，盖上皿盖。 ⑤试管口通过火焰，并塞上棉塞 ③试管口通过火焰 ⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线。 ①接种环只蘸一次菌液,但要在培养基不同位置连续划线多次 ②划线首尾不能相接 ③每次划线前接种环进行灭菌 ④划线后,培养皿倒置培养 ⑤一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的；存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。 注意事项 平板划线法操作过程中几次灼烧接种环的目的 灼烧时期 目的 取菌种前 每次划线前 接种结束后 杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者 杀死上次划线时残留菌种，使下一次划线的菌种直接来源上次划线的末端，从而使每次划线时菌种数目逐渐减少，直至得到单个细胞 杀死接种环上原有微生物 培养 完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右的恒温培养箱中培养24-28h。 结果分析与评价 未接种培养基表面是否有菌落生长？ 接种的培养基表面是否出现单菌落，菌落大小、形状、颜色是否一致，是否复合微生物的特征？ 若培养基表面出现了其他菌落，可能有哪些原因引起？ B 1.(2023·湖北襄阳四校联考)微生物培养过程中，要重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作，正确的是(　　) A.煮沸消毒法中100 ℃煮沸5～6 min可以杀死全部微生物的细胞和芽孢、孢子B.将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌 C.加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌 D.家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌 B 3.(2023·江苏南京调研)下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法正确的是(　　) A.步骤①后需将培养基灭菌并调节pH B.步骤①②③操作时需要在酒精灯火焰附近进行 C.步骤③到④的过程中，接种环共灼烧处理了5次 D