内容正文:
第2章 细胞工程
2
第2节 动物细胞工程
一 动物细胞培养
学习目标
理解动物细胞培养的条件并构建动物细胞培养的流程图(科学探究)
01
02
说明干细胞的种类和应用
(科学思维)
从社会中来
在治疗大面积烧伤时,通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说,自体健康皮肤非常有限,使用他人皮肤来源又不足,而且会产生免疫排斥反应。那么,怎样才能获得大量的自体健康皮肤?能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤?
异体皮肤移植
异体皮肤移植
通过细胞培养构建的人造皮肤
借助动物细胞培养技术构建人造皮肤
不能用单个细胞培养出可供移植的皮肤
首例胚胎移植成功
首创动物组织体外培养法
发现哺乳动物精子获能现象
体细胞核移植成功
试管家兔诞生
创立单克隆抗体技术
胚胎分割移植成功
分离和培养小鼠胚胎干细胞
克隆羊多莉诞生
获得诱导多能干细胞
单细胞基因组测序进行遗传病筛查的试管婴儿诞生
我国科学家首次培育了体细胞克隆猴
1890年
1907年
1951年
1958年
1959年
1975年
1978年
1981年
1996年
2006年
2014年
2017年
动物细胞工程的发展历程
4
动物细胞工程的科技成果
通过动物细胞培养构建的人造皮肤
1、概念:
从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适当的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。
2、目的:
获得细胞或细胞产物;不能获得完整动物个体。
3、原理:
细胞增殖(有丝分裂)
那么,动物细胞的培养需要哪些条件呢?
动物细胞培养
动物体
组织
单个细胞
细胞生长和增殖
取出
分散
适宜条件
6
7
糖类、氨基酸、无机盐、维生素 …
无菌、无毒的环境
适宜的温度、pH和渗透压
适宜的气体环境
充足的营养、稳定的内环境
将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基
含人类未知、细胞生长增殖所必需的物质,满足细胞对未知营养成分的需求。
培养基的构成:合成培养基 + 血清等天然成分
一般用液体培养基,
也称为培养液
一、动物细胞培养的条件
知识延伸
动物细胞培养通常要添加血清的原因
血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中,蛋白质主要为白蛋白和球蛋白;氨基酸有多种,是细胞合成蛋白质的基本原料,且有些氨基酸是动物细胞本身不能合成的(称为必需氨基酸),必须由培养液提供;激素有胰岛素、生长激素等。血清还含有多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活性物质,它们能促进细胞的生长、增殖和贴附。因此,在培养动物细胞时,为保证细胞能够顺利生长和增殖,一般需在培养基中添加10%~20%的血清等天然成分。
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糖类、氨基酸、无机盐、维生素 …
无菌、无毒的环境
适宜的温度、pH和渗透压
适宜的气体环境
①培养液、培养用具:灭菌处理;
②无菌操作;
③适量添加抗生素
定期更换培养液,以便清除代谢物。
①适宜的温度:哺乳动物细胞培养的温度多以___________ 为宜;
②适宜的pH:多数动物细胞生存的适宜pH为 ________ ;
③适宜的渗透压:
维持细胞正常的形态和功能。
36.5±0.5℃
7.2-7.4
一、动物细胞培养的条件
强烈对比
内环境的理化性质
①人体细胞外液的温度一般维持在:36.5±0.5℃
②正常人的血浆近中性,pH为:7.35~7.45
③渗透压:指溶液中溶质微粒对水的吸引力
在37℃时,人的血浆渗透压约为:770 kPa
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糖类、氨基酸、无机盐、维生素 …
无菌、无毒的环境
适宜的温度、pH和渗透压
适宜的气体环境
维持培养液的pH
95%空气 + 5%CO2 的CO2 培养箱
O2:细胞代谢所必需
CO2培养箱
松盖培养瓶
培养皿
一、动物细胞培养的条件
注意说明
动物和人体的免疫系统可抵御各种微生物对机体的入侵,因此体内细胞生活的内环境几乎是无菌、无毒的。而离体培养的细胞对微生物和有毒物质的防御能力极低,所以其培养环境中一旦有细菌、真菌或病毒等微生物的污染,培养的细胞就会死亡。
一、动物细胞培养的条件
进行动物细胞培养时,有时需要在培养液中加入抗生素,其作用是什么?在抗生素的选择上需要注意种类和剂量,为什么?
在培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长。
选择抗生素要注意种类和剂量,以保证抗生素对培养的细胞无害。
问题探讨
二、动物细胞培养的过程
体外培养的动物细胞分类
体外培养的动物细胞可以分为两大类:
一类细胞能够悬浮在培养液中生长增殖;
悬浮培养瓶
另一类则需要贴附于某些基质表面才能生长增殖,大多数细胞属于这种类型,这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上,这种现象称为细胞贴壁。
二、动物细胞培养的过程
“细胞