第十章 紫外-可见分光光度法 （课件）- 《分析化学》同步教学（中国中医药出版社）

第十章 紫外-可见分光光度法 ◆学习目标⊙ ◆知识要求⊙ ◆能力要求⊙ ◆学习目标 通过学习光谱分析法概论、紫外-可见分光光度法的基本原理、分光光度计的基本构造、降低测量误差的方法、常用的定性、定量方法等知识，了解光学分析法的知识体系，熟悉紫外-可见分光光度法的实际应用，会用紫外-可见分光光度计测定溶液的吸光度，并对有关物质进行定性定量分析，为学习红外分光光度法、荧光分光光度法、核磁共振波谱法及药物分析课中有关药品的定性鉴别、杂质检查和含量测定方法奠定基础。 ◆知识要求 1．掌握光的吸收定律概念、表达式及条件，吸光系数和吸收光谱的意义，常用定量分析方法的原理和应用。 2．熟悉紫外-可见分光光度计的基本结构、吸光度测量条件的选择、偏离光的吸收定律的主要因素。 3．了解光谱分析法的分类、紫外-可见吸收光谱的产生机制、定性分析的依据和方法。 ◆能力要求 1.能够用光的吸收定律解决定量计算问题 。 2.能够绘制吸收光谱曲线，找出被测组分的最 大吸收波长。 3.能够绘制标准曲线，并能应用标准曲线对样品进行定量分析。 4.会使用常见的紫外-可见分光光度计测定溶液的吸光度。 案例导入 在夏天参加户外活动时，如果天气晴朗，就应该注意保护皮肤，否则，暴露在火辣辣太阳之下的皮肤，数小时后就会出现红肿、瘙痒、发热、刺痛症状，数日后出现蜕皮现象，这表明太阳光中有一种光线能伤害生物细胞。科学家研究证实，这种光线是紫外线。 根据可见光、紫外光与物质分子的相互作用建立了紫外-可见分光光度法， 第一节 概述 根据待测物质（原子或分子）发射或吸收的电磁辐射，以及待测物质与电磁辐射的相互作用而建立起来的定性、定量和结构分析方法，统称为光学分析法。 利用光谱进行定性、定量和结构分析的方法称为光谱分析法，简称光谱法。 第一节 概述 一、物质对光的选择性吸收 单色光: 单一波长的光束 复色光: 含有多种波长的光束 电磁波谱: 以波长大小顺序排列的电磁波谱图 波长 10pm 300pm 200nm 400nm 800nm 500mm 1cm 1m 光谱 射线 X射线 紫外光 可见光 红外光 微波 无线电波 方法 光谱法 分光光度法 光谱法 核磁共振 可 见 光 第一节 概述 红光与绿光互补、紫光与黄光互补，等等。 白光的组成 白光的色散 第一节 概述 二、透光率与吸光度 I0＝Ia + It + Ir I0＝Ia + It 第一节 概述 透射光强度It与入射光强度I0的比值称为透光率或透光度T 透光率的负对数为吸光度A 第一节 概述 三、吸收光谱曲线 概念：以波长λ为横坐标，吸光度A为纵坐标所描绘的曲线，称为吸收光谱曲线，简称吸收光谱。 特点：在相同条件下，同一物质的不同浓度的溶液，其吸收光谱曲线相似，且λmax相同。这是定性分析的基础。 第一节 概述 吸收光谱曲线示意图  A 480 520 560nm max=515 第一节 概述 四、紫外-可见分光光度的特点 课堂活动 1．紫外-可见光的波长范围是 A．200~400nm B．400~760nm C．200~760nm D．360~800nm 2．下列叙述错误的是 A．光的能量与其波长成反比 B．有色溶液越浓，对光的吸收也越强烈 C．物质对光的吸收有选择性 D．光的能量与其频率成反比 第一节 概述 课堂活动 3．紫外-可见分光光度法属于 A．原子发射光谱法 B．原子吸收光谱法 C．分子发射光谱法 D．分子吸收光谱法 4．分子吸收可见-紫外光后，可发生哪种类型的分子能级跃迁 A．转动能级跃迁 B．振动能级跃迁 C．电子能级跃迁 D．以上都能发生 第一节 概述 第一节 概述 点滴积累 1．光的本质是电磁波；物质对光的吸收具有选择性。 2．吸光度与透光率的关系是 : 3．吸收曲线是溶液在一定条件下的吸光度随入射光波长变化而变化的曲线。 第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理 一、光的吸收定律 当一束平行的单色光通过均匀、无散射的含有吸光性物质的溶液时，在入射光的波长、强度及溶液的温度等条件不变的情况下，该溶液的吸光度A与溶液的浓度c及