1.2.2微生物的选择培养与计数课件2023-2024学年高二下学期生物人教版选择性必修3

1.2.2微生物的选择培养和计数 选择培养基 微生物的选择培养 01 02 微生物的数量测定 探究·实验 03 04 目 录 CONTENTS 选择培养基 1973年，科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌( Thermus aquaticus)，进而从这种菌中提取出耐高温的DNA聚合酶。这种酶目前已被广泛用于体外扩增DNA片段的聚合酶链式反应(PCR)。 实验室中微生物的筛选，也可以应用同样的原理，即人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度和pH等) ，同时抑制或阻止其他微生物的生长。 1.为什么水生栖热菌能从热泉中被筛选出来呢？ 这是因为水生栖热菌能在 70~80 ℃的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。 2.如何从众多的微生物中筛选出单一菌种？ 实验室筛选微生物原理： 人为提供_______________的条件（包括_____、_____和_____等），同时_______________________ 选择培养基 根据微生物对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 有利于目的菌生长 抑制或阻止其他微生物的生长 营养 温度 pH 耐热微生物 耐寒微生物 石油分解菌 选择培养基 允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 1.概念： 2.方法： 分离得到酵母菌、霉菌等 分离固氮菌 分离自养型微生物 不加含碳有机物的培养基 不加氮源的培养基 加入青霉素的培养基 （1）在培养基中加入某种化学物质。 分离得到金黄色葡萄球菌 加入高浓度食盐的培养基 （2）改变培养基中的营养成分。 （3）改变微生物的培养条件。 耐高温微生物 高温环境下培养 厌氧型微生物 兼性厌氧型 无氧环境下培养 怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌? 培养基中加氨苄青霉素 具有氨苄青霉素抗性的菌落 没有氨苄青霉素抗性的细菌 培养基应有菌落 没有氨苄青霉素抗性的细菌被淘汰 思考·讨论--培养基配方的设计 尿素［CO(NH2)2］含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成NH3，再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，脲酶催化尿素分解产生NH3，NH3可以作为细菌生长的氮源。 (细菌生长的氮源) 尿素 NH3 脲酶 尿素分解菌 思考·讨论--培养基配方的设计 1.如果让你配制一种培养基，让土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？ 培养基的配方中应含有微生物生长所需的营养要素——碳源、氮源、水、无机盐等。由于绝大多数微生物都能利用葡萄糖，分解尿素的细菌也能利用葡萄糖，可以用葡萄糖作为碳源，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，在培养基中加入尿素提供氮源，使培养基具有了选择作用。该培养基以尿素作为唯一氮源，只允许能以尿素作为氮源的微生物生长。 思考·讨论--培养基配方的设计 2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？ 该培养基与普通培养基相比较，共同点是都认有机碳（如葡萄糖）作为碳源，都有水和无机盐；不同点是该培养基以尿素作为唯一氮源，使只有能以尿素作为氮源的微生物生长。 微生物的选择培养 分解尿素细菌鉴定原理： CO(NH2)2 + H2O 2NH3 + CO2 脲酶 呈碱性，遇酚红指示剂呈 色。 红 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。 鉴别培养基：在培养基中加入某种指示剂或化学药品(不影响微生物正常生长)，使微生物的某种代谢产物与培养基中的特定指示剂或化学药品发生反应。从而达到鉴定的作用。 细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，因此可以通过检测培养基pH的变化来判断是否发生了该化学反应，进而判断该菌是否为尿素分解细菌。 ①铲取土样，将样品装入纸袋中。 90mL无菌水 9mL无菌水 稀释10倍菌液 ②将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀，制成菌液。 取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。 梯度稀释 微生物的选择培养 ③取0.1mL菌液，滴加到培养基表面。 ④将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。 ⑤将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器冷却后，再进行涂布。 ⑥用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。 沥干 移液枪 涂布平板 微生物的选择培养 微生物的计数方法比较 内容 直接计数法 间接计数法 主要用具 显微镜、细菌计数板或血细胞计数板 涂布器 计数依据 菌株本身 培养基上菌落数 优点 计数方便、操