第三章 基因工程默写-2023-2024学年高二下学期生物人教版选择性必修二

班级： 姓名： 学号： 高三生物 编写者：余莎 时间：12.25 基因工程默写（一） 【一、基因工程的工具】 1、限制性内切核酸酶(简称：______________)，主要是从__________生物中分离纯化出来的。可以识别________的核苷酸序列并切开特定部位的两个核苷酸之间的______________键，产生________末端或________末端。不同的限制酶也能切出____________的黏性末端。双酶切的好处是________________________________，避免目的基因的自身环化、目的基因和载体的反向连接，提高连接的有效性。 2、DNA连接酶连接两个______________，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的____________键。按来源可分为E·coli DNA连接酶和______________。前者只能连接黏性末端，后者能连接________________，但是连接效率低。 3、载体：①种类：________、λ噬菌体的衍生物或噬菌体、动植物病毒等。 克隆载体必须的组件有：具有一个或多个_________________；具有_____________在受体细胞中能进行复制，或________到受体DNA上，随受体DNA同步复制；载体上的________基因一般是一些抗生素的抗性基因。作用是________________________________。天然的质粒必须经过改造才能作为载体。③表达载体还需______________、______________等元件。 4、几种酶的比较 去除DNA污染，使用的酶是______________；将双链DNA局部解旋为单链，形成两条长链的酶是______________，断裂______________键；识别并结合______________，驱动转录的酶是______________；PCR（体外DNA复制）所需的酶是______________，形成______________键；构建重组DNA分子所需要的酶是______________、______________。 【二、基因工程的操作步骤】 1、基因工程的四个操作步骤：__________________、__________________、__________________、__________________。 2、目的基因的获取：目的基因序列未知获取目的基因的方法是______________；目的基因序列已知且较短获取目的基因的方法是________________；利用基因数据库查询后可用________________方法得到目的基因；利用提取到的总mRNA可以通过________________得到目的基因；得到的目的基因可利用__________扩增。 3、影响重组效率的主要因素是_____________________________________（写2点） 4、将目的基因导入微生物细胞的方法：一般先用_______处理细胞使细胞处于一种能吸收周围环境中__________分子的生理状态（简称_____________），然后再将重组的基因表达载体导入其中。可用摇床慢速培养使_________________________。受体细胞选择时需注意：如要合成糖蛋白、有生物活性的胰岛素，必须用真核生物酵母菌(需内质网和高尔基体的加工、运输等)，不能用大肠杆菌(只有________________，没有内 质网、高尔基体等)。 5、将目的基因导入动物细胞的方法是 ________________，受体细胞可以是_______________、______________也可以是造血干细胞等等。通过_______________、______________（填技术）最终代孕母体妊娠分娩得到转基因动物。 6、将目的基因导入植物细胞的方法最常用的是____________。第一次拼接将目的基因拼接到_______质粒的__________中，将_______________导入到农杆菌中（也称转化）。第二次拼接是将目的基因整合到_____________________________上。通过________________________（填技术）最终得到完整的植株。此过程中需要外植体先进行_____________处理，用______________________农杆菌侵染植物细胞后后，还需要用植物细胞不敏感的抗生素处理，目的是___________________。 根据右图，筛选得到含目的基因的农杆菌，培养基中需添加__________________