项目十二紫外一可见分光光度法（课件）《《分析化学基础（供药学类专业用第2版）》紫外一可见分光光度计同步教学（中国医药科技出版社第二版）

紫外一可见分光光度法 紫外-可见分光光度计 紫外-可见分光光度计的性能指标与评价 紫外-可见分光光度计的性能指标与评价 1.波长准确度和波长重复性 2.光度准确度 3.光度重复性 4.光度线性范围 5.单色器分辨率 6.光谱带宽 7.杂散光 8.噪声 9.基线稳定性 10.基线平直性 紫外-可见分光光度计的性能指标与评价 一、波长准确度和波长重复性 1.产生波长误差的原因： （1）仪器在运输或装机过程中，波长装置中各部件与出射狭缝间相对位置发生变化； （2）工作室温度、湿度变化过大，记录系统的机械零件磨损、积尘而不能正常转动，记录纸受潮变形等。 紫外-可见分光光度计的性能指标与评价 一、波长准确度和波长重复性 2. 波长重复性不好原因：与引起波长误差的原因相似。 波长校正应在整个波长范围的不同区域进行，不能只在个别点进 行波长校正。 紫外-可见分光光度计的性能指标与评价 二、光度准确度 定义：指标准样品在最大吸收峰处测量时获得的样 品吸光度与其真实吸光度之间的偏差。 偏差愈小，准确度愈高。 检测的方法：主要有标准溶液法和滤光片法。 紫外-可见分光光度计的性能指标与评价 三、光度重复性 定义：指在同样条件下对某一试样进行多次重复测 量吸光度，求得各次测量值对平均值的偏差和偏差的平 均值。 当测量信号小，仪器噪音增大时，光度重复性变差。 紫外-可见分光光度计的性能指标与评价 四、光度线性范围 定义：指仪器光度测量系统对于照射到接收器上的 辐射功率与系统的测定值之间符合线性关系的功率范围，即仪器的最佳工作范围。 在此范围内测得物质吸光系数是一个常数，仪器的 光度准确度最高。 紫外-可见分光光度计的性能指标与评价 五、单色器分辨率 表示可分辨相邻两吸收带的最小波长间隔的能力。 它是狭缝宽度和单色器色散率的函数，较小的狭缝可得 到较大的分辨率。通常在可允许噪音水平条件下选择最 小的狭缝宽度。 紫外-可见分光光度计的性能指标与评价 六、光谱带宽 指从单色器射出的单色光最大强度的1/2处的谱带宽度。 光谱带宽与狭缝宽度、分光元件、准直镜焦距有关，可以用测量钠灯的发射谱线如钠双线（589.0nm、589.6nm）的宽度方法来测量。 紫外-可见分光光度计的性能指标与评价 七、杂散光 指所需波长单色光以外其余所有的光。是测量过程 中主要误差来源。 测定某种截止滤光器在边缘波长或某一波长的透光率，即可表示杂散光的强度。 紫外-可见分光光度计的性能指标与评价 八、噪声 是叠加在待测量分析信号中不需要的信号。它的存 在实际上限制了光度测量的灵敏度和准确度。因此信噪 比（S／N）是一项非常重要的参数。 紫外-可见分光光度计的性能指标与评价 九、基线的稳定性 是指不放置样品情况下扫描100％T或0％T线时读数 偏离的程度，是仪器噪音水平的综合反映。一般取最大 的峰缝之间的值作为绝对噪音水平。 紫外-可见分光光度计的性能指标与评价 十、基线平直性 指在不放置样品情况下，扫描0％T或100％T时基线倾斜或弯曲程度。 基线平直性不好的原因：光学系统失调、两个光束不平衡、仪器受震，光源位置松动。 谢谢！ $$