项目十二紫外一可见分光光度法（课件）《《分析化学基础（供药学类专业用第2版）》紫外一可见分光光度计同步教学（中国医药科技出版社第二版）

紫外-可见分光 光度计的基本构造 仪器的基本组成部件 光源 单色器 吸收池 检测器 信号显示 分光光度法(可见分光光度法) 0.575 光源 单色器 吸收池 检测器 显示 范第姆特考察了影响柱效的多种因素，推导出了如下关系式： 范第姆特方程将理论板高和流动相流速联系在一起，并表达了被分离组分在柱中纵向扩散和传质阻力与理论板高的定量关系。 4 分光光度法(可见分光光度法) 参比 样品 I0 It 注意比较 范第姆特考察了影响柱效的多种因素，推导出了如下关系式： 范第姆特方程将理论板高和流动相流速联系在一起，并表达了被分离组分在柱中纵向扩散和传质阻力与理论板高的定量关系。 5 光源 在可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。 作用：提供符合要求的入射光 光源 可见光 光源 钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500nm。最适宜的范围是380～1000nm。 氙灯 氢灯 钨灯 单色器 棱镜 玻璃350～3200 nm，石英185～4000 nm； 光栅 波长范围宽，色散均匀，分辨性能好，使用方便 棱镜 从光源的连续光谱分解为单色光，并准确的分出某一波长范围的光，作为吸光光度分析的光源。 棱镜分光示意图 入射狭缝 准直透镜　 棱镜　　聚焦透镜 出射狭缝 白光 红 紫 λ1 λ2 800 600 500 400 吸收池（比色皿） 作用：用于盛放盛参比溶液和被测试液，且决定透光液层厚度的器件 吸收池（比色皿） 比色皿用于盛参比溶液和被测试液。一般为长方形， 有0.5cm、1.0cm 、2.0cm、3.0cm等规格。 同样厚度比色皿之间的透光率相差应小于0.5%。 玻璃 —仅适用于可见光区 石英 —适用于紫外和可见光区 问题：在使用比色皿的过程中应该注意哪些事项？？？ 检测器 作用：对透过吸收池的光做出相应，并把它转变成 电信号输出，其输出电信号大小与光的强度成正比。 常用的是：光电池，光电管，光电倍增管。 信号显示器 作用：放大检测器产生的电信号，经放大处理后，用一定的方式显示出来，以便于计算和记录。 低档仪器：刻度显示； 中高档仪器：数字显示， 自动扫描记录。 分光光度计的使用 预热20min 调节T = 0 调节T = 100% （A=0） 测定样品的吸光度A 分光光度计的保养与维护 安置在干燥、无污染的地方； 仪器内的防潮硅胶应定期更换或再生； 仪器停止工作时，必须切断电源，应按开关机顺序关闭主机和稳流稳压电源开关； 比色皿使用完毕后，立即用蒸馏水或有机溶剂冲洗干净，并用柔软清洁的纱布把水渍擦净； 仪器经过搬动，请及时检查并纠正波长精度。 $$