项目十二紫外一可见分光光度法（课件）《《分析化学基础（供药学类专业用第2版）》紫外-可见分光光度法的应用同步教学（中国医药科技出版社第二版）

紫外分光光度法 紫外分光光度法应用 1 03 项目按紫外分光光度法应用-1 ·定性及定量分析 2 目 标 掌握紫外分光光度法定性分析技能 01 掌握紫外分光光度法定量分析技能 02 相关标题文字 02 一、 定性分析： （1）化合物的鉴定 根据化合物吸收光谱的形状、吸收峰的数目、强度、位置进行定性分析。 待测样品 相同条件 样品谱 标准物质 标准谱 ①比较法 吸收曲线比较法。 吸收波长和摩尔吸收系数比较法。 4 二、紫外-可见分光光度法定量分析 1. 单组分物质的定量分析 测定条件： 选择合适的分析波长（λmax） A：0.2-0.8 选择适当的参比溶液 （1）标准对照法 （1）标准对照法 （2）吸收系数法 吸收系数法 没有标准品可供比较测定的条件下，按照文献规定的条件测定被测物的吸光度，从样品的配制浓度、测定的吸光度及查出的吸光系数即可计算样品的含量，因为 A a样=———— c×b 例如 已知维生素B12在361 从样品的配制浓度、测定的吸光度及 查出的吸光系数即可计算样品的含量，因为 （3）标准曲线法 （3）标准曲线法 1 2 3 4 5 样品 标液 C1 C2 C3 C4 C5 CX A A1 A2 A3 A4 A5 AX A λ CX AX 05 2.多组分的同时测定 当溶液存在两种或两种以上待测组分时，用分光光度法可同时测定。 （1）吸收光谱不重叠。 （2）吸收光谱重叠。 16 T6紫外分光光度计 02 紫外分光光度 紫外分光光度计光路图 一、紫外分光光度计光路图 18 仪器正面 仪器背面 仪器背面 键盘布局 主菜单界面 设定工作波长 试样池设定 自动校零 测量后显示的状态 数据打印 功能扩展 仪器使用注意事项 02 紫外分光光度计的维护及保养 组成流程图 紫外分光光度计组成 32 02 紫外分光光度计的维护及保养 一、维护和保养 1.对仪器工作环境的要求 安装台要稳固，仪器周围不应有强磁场，室内温度保持在15—28℃。相对湿度控制在45%--65%，不应超过70%。室内无腐蚀性气体（如二氧化硫及酸雾等），应与化学分析操作室隔离，室内光线不易过强。 33 02 紫外分光光度计的维护及保养 2.仪器保养和维护方法 （1）仪器工作的电源一般允许在220v±10%.最好配置稳压器 （2）为了延长使用寿命，不用时不要开光源灯。 （3） 要经常更换单色器盒内的干燥剂，防止色散原件受潮生霉。 （4）必须正确使用吸收池，保护吸收池光学面。 （5）光电器不能长时间曝光，应避免强光照射或受潮积尘。 34 02 紫外分光光度计的维护及保养 1.使用前和使用后要彻底清洗，尤其是盛过蛋白质等溶液的吸收池，干后形成一层膜，不易洗去。通常吸收池不用时可放在1%洗洁净液中浸泡，去污效果好，使用时用水冲洗干净，要求池壁不挂水珠，还可以用绒布丝线或软塑料制作一个小刷子清洗杯子。 二、使用吸收池过程中的注意事项： 35 02 紫外分光光度计的维护及保养 2.严禁用手指接触透光面，因指纹不易洗净。严禁用硬纸或布擦拭透光面，只能使用镜头纸和绸布。 3.严禁加热烘烤。 4.样品溶液量是吸收池的4/5为宜，使用挥发性溶液时应加盖。 5.凡含有腐蚀玻璃的物质（如F-等）的溶液，不得长时间放置吸收池中。 二、使用吸收池过程中的注意事项： 36 谢谢观看！ 37 Bruises Chairlift Does You Inspire You, track 4 2009 Alternative 241570.05 $$