内容正文:
生
物
一
轮
复
习
第十一单元 发酵工程
第1讲 微生物的培养技术与应用
考点1 微生物的培养技术
考点2 微生物的选择培养和计数
1
微生物的培养技术
2
一、培养基的配制
培养基
成分
概念
作用
类型
按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
液体培养基、固体培养基
选择培养基、鉴别培养基
一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质
条件
PH、特殊营养物质、O2
组分 含量 提供的主要营养
牛肉膏 5g 碳源、磷酸盐和维生素等
蛋白胨 10g 氮源和维生素等
NaCl 5g 无机盐
H2O 定容至1000mL 水
物理性质
功能
有无琼脂
区别
1、基本成分
成分 含义 作用 来源
碳源 _________ 合成含碳物质和一些代谢产物的原料,有些也是异养生物的能源物质 无机碳源:CO2、NaHCO3等;有机碳源:糖类、牛肉膏、石油等
氮源 _________ _______________ 无机氮源:N2、NH3、铵盐、硝酸盐等;有机氮源:牛肉膏、蛋白胨等
无机盐 为微生物提供除碳、氮之外的各种重要元素,包括大量元素和微量元素 ______________ 无机化合物:KH2PO4、K2HPO4、NaCl等
水 生物体含量最高的无机化合物 _________________ H2O、代谢产物
合成蛋白质、核酸等含氮物质及代谢产物的原料
提供碳元素的物质
提供氮元素的物质
为微生物提供无机营养,细胞组成成分、调节培养基的pH、酶的激活剂等
良好的溶剂,参与化学反应、维持大分子结构稳定等
2、特殊需求:
满足微生物对 ___________________ ___的需求
④培养厌氧微生物时,需要提供_____的条件。
①培养乳酸杆菌时,需要在培养基中添加_______;
②培养霉菌时,需要将培养基调至_____;
③培养细菌时,需要将培养基调至____ _______;
维生素
酸性
中性或弱碱性
无氧
pH、特殊营养物质、氧气
特殊营养物质:主要指生长因子
概念:是一类调节微生物正常生长代谢所必需,但不能用简单的碳、氮源自行合成的有机物。
种类:维生素、碱基、胺类等
来源:酵母膏、五米浆、麦芽汁、蛋白胨、动植物组织提取液等
⑤培养病毒时,不能用普通培养基,需要用活细胞或组织培养。
细菌 只需要有以上物质就可以了吗?
1.(2021·北京卷,12)人体皮肤表面存在着多种微生物,某同学拟从中分离出葡萄球菌。下述操作不正确的是( )A.对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌B.使用无菌棉拭子从皮肤表面取样C.用取样后的棉拭子在固体培养基上涂布D.观察菌落的形态和颜色等进行初步判断
2.不同的微生物对营养物质的需求各不相同,但一般都需要水、碳源、氮源和无机盐。下列有关微生物所需营养物质的描述,正确的是( )A.氮源物质只能为该微生物提供必要的氮元素B.有些碳源也可以给微生物的生长提供能源C.无机盐是微生物不可缺少的营养物质,所以无机盐越多越好D.所有微生物所需营养是一样的
C
B
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二、无菌技术
——在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。
1、常用方法:
类型 适用范围 操作方法
消
毒
灭
菌
煮沸消毒法
日常生活
100 ℃煮沸5~6 min
巴氏消毒法
不耐高温的液体,如牛奶
62~65 ℃煮30 min
或80-90 ℃煮30s-1 min
化学药剂
生物活体、水源等
擦拭等,如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源
紫外线
紫外线照射30 min
灼烧灭菌
接种的金属工具、接种时用的试管口或瓶口等
直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧
干热灭菌
耐高温、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具等
物品放入干热灭菌箱,160~170 ℃加热2~3h
湿热灭菌
培养基等,生产和实验室常用
高压蒸汽灭菌锅内,100 kPa,温度121 ℃,15~30 min
接种室、接种箱,超净工作台
2、适用范围
高压蒸汽灭菌
3.微生物培养过程中,要十分重视无菌操作,现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作,以防止杂菌污染,请分析下列操作,错误的是( )①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢②接种操作要在酒精灯火焰附近进行③家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌④培养基要进行高压蒸汽灭菌⑤加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌A.① B.②③C.③④ D.③⑤
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D
三、微生物的纯培养
在微生物学中,将接种于培养基内