第八章 紫外 - 可见分光光度法（课件）- 《分析化学》第三课时同步教学（人卫版第9版）

紫外-可见分光光度法 分析化学 LOGO 紫外-可见分光光度法 1. 分光光度计的基本构造 2. 仪器的基本类型。 【主要内容】 第三节 紫外-可见分光光度计 紫外-可见分光光度法 一、基本结构 0.575 光源 单色器 吸收池 检测器 显示器 紫外-可见分光光度法 （一）光源 作用：提供足够强度的、稳定的连续光谱。 1. 钨灯或卤钨灯 属热辐射光源，能发射360nm~800nm波长范围的连续光谱，适用于可见光区的测量。 2. 氢灯或氘灯 属气体放电发光，发射150nm~400nm的连续光谱，适用于紫外光区的测量。 紫外-可见分光光度法 （二）单色器 作用：将光源发出的复合光分解并从 中分出所需波长的单色光。 组成：进光狭缝、准直镜、色散元件、 聚焦透镜和出光狭缝。 紫外-可见分光光度法 色散元件 棱镜 光栅 对不同波长的光折射率不同，得到的波长疏密不均的光谱。 经衍射和干涉作用,不同波长的投射方向不同，得到的波长均匀分布的连续光谱。 玻璃棱镜:适用于可见区 石英棱镜:适用于紫外区 棱镜 紫外-可见分光光度法 （三）吸收池（比色皿）：盛放被测样品 玻璃——能吸收UV光，仅适用于可见光区 石英——不能吸收紫外光，适用于紫外和可见光区 要求：匹配性（对光的吸收和反射应一致） 紫外-可见分光光度法 作用：将通过溶液后的透射光强度大小转变为光电信号进行检测。 光电倍增管 透射光 入射光 入射光 透射光 二极管阵列 （四）检测器：将光信号转变为电信号的装置 紫外-可见分光光度法 8 作用：将检测器检测得到的信号进行处理后以适当的形式显示出来。 显示器 （五）显示器：信号处理和显示系统 紫外-可见分光光度法 9 二、仪器的基本类型 单波长分光光度计 双波长分光光度计 单光束分光光度计 双光束分光光度计 紫外-可见分光光度法 （一）单波长单光束分光光度计 特点： 结构简单，操作方便，维修容易，适用于常规分析。但测量结果易受电源波动的影响。 光源 单色器 吸收池 检测器 信号处理显示 紫外-可见分光光度法 （二）单波长双光束分光光度计 双光束分光光度计也是采用一个单色器，但是将单色器产生的单色光，用一个旋转扇面镜（又称斩光器）分成两束交替断续的单色光，分别通过参比溶液和样品溶液，同时用另一同步旋转扇面镜将两束透过光交替投射到检测器上。测得的是透过样品溶液和参比溶液的光信号强度之比。 特点： 由于两束光在很短的时间内交替通过空白与试样溶液，避免因光源强度不稳定而引起的误差。 紫外-可见分光光度法 （三）双波长分光光度计 特点： 测定时不需要参比池，可消除由于两池不匹配所带来的误差。适用于多组分混合物、混浊试样分析，以及汆子背景干扰或共存组分吸收干扰的情况。 紫外-可见分光光度法 1. 仪器测量条件的选择 2. 显色反应条件的选择 3. 参比溶液的选择 【主要内容】 第四节 分析条件的选择 紫外-可见分光光度法 1.检测波长的选择 依据待测组分吸收光谱（曲线）的特性可对物质进行定性分析；定量分析时通常选最强吸收带的最大吸收波长 最为测量波长，这样可提高测量的准确度。 一、仪器测量条件的选择 紫外-可见分光光度法 2.狭缝宽度的选择 合适的狭缝宽度，应以减小狭缝宽度时样品的吸光度不再增加为标准。通常，狭缝宽度为吸收峰半宽度的1/10。 紫外-可见分光光度法 分析误差大 A＝K·C·L L 浓度C 吸光度A控制在0.2～0.8的范围(透光率T控制在20%～65%之间)。 （1）控制溶液的浓度； （2）改变吸收池的厚度。 （1）吸光度测定值选择范围： （2）控制方法： 吸光度太大 吸光度太小 3.吸光度读数范围的选择 紫外-可见分光光度法 二、显色反应及条件 为什么要显色呢？ 对紫外-可见光不吸收的待测组分，在加入适当的试剂与待测组分反应后，生成有较强吸收的物质，此时可以使用分光光度法进行测定。 加入的试剂叫显色剂。 发生的反应叫显色反应。 紫外-可见分光光度法 1. 显色剂的用量：显色反应在一定程度上是可逆的，为了减少反应的可逆性，可适当加入过量的显色剂，但不能过量太多。 2. 溶液的酸度：大部分显色剂本身是有机弱酸，酸度太高或太低直接影响显色剂的平衡浓度。 3. 显色温度：一般在室温下即可完成。 4. 显色时间：对显色反应比较慢的反应，需要待显色稳定后才能测定；对于显色反应生成的化合物，易被空气氧化、光照分解的，则应在显色稳定后快速测定；对于见光易分解变质、