内容正文:
吸光光度法
L/O/G/O
化学分析方法的特点
例如,含铁量为 0.01 %试样,取样1 g,铁含量为
1×10-4 g = 0.1 mg
若用c = 0.01 mol/L 标准溶液进行
滴定,化学计量点时消耗K2Cr2O7 的体积:
0.1
55.85
= 0.01v
v = 0.2 mL
滴定操作无法进行,
∴ 灵敏度低。
1 / 6 K2Cr2O7
准确度高
灵敏度低
常量组分的测定
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分光光度法的特点
灵敏度高
操作简便
应用广泛
相对误差2—5%
适于微量组分的测定
例如,上例中铁的测定,
可采用分光光度法进行分析.
含量高,用光度法测定使结果产生较大的误差,准确度低;
含量低,用光度法测定结果产生的误差较小,准确度可以。
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依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称为吸光光度法,主要有:
红外
吸收光谱
分子振动光谱,吸收光波长范围 2.5 1000m 主要用于有机化合物结构鉴定。
紫外
吸收光谱
电子跃迁光谱,吸收光波长范围 200 400 nm
(近紫外区) ,可用于结构鉴定和定量分析。
可见
吸收光谱
电子跃迁光谱,吸收光波长范围 400 780 nm
主要用于有色物质的定量分析。
第一节 吸光光度法基本原理
一、概述
二、可见吸收光谱
1.光的基本性质
光是一种电磁波,具有波粒二象性。
光的波动性可用波长、频率、光速c、
波数(cm-1)等参数来描述:
= c ; 波数 = 1/ = /c
光的粒子性:光是由光子组成,光子的能量:
E = h = h c /
光的波长越短(频率越高),其能量越大。
人眼能感觉到的光称为可见光。
400nm ~ 780 nm。
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颜色互补
有意思!
CuSO4溶液 : 蓝色
吸收白光中的黄光
蓝色 – 黄色为互补光
KMnO4溶液 : 紫红色
吸收白光中的绿光
紫红色 – 绿色为互补光
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物质对光的选择性吸收
当一束光照到物质上时,
光与物质发生相互作用,
于是产生光的反射、散
射、吸收和透射。
由于物质的组成和结构不同,对不同波长
的光产生的反射、散射、吸收和透射的程
度不同,物质呈现的颜色也就不同.
界面反射损失
入射光束
溶液中
散射损失
透射光束
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。界面反射损失
当一束白光通过一有色溶液时,一些波长的光被溶液吸收,另一些波长的光则透过。透射光(或反射光)刺激人眼而使人感觉到颜色的存在。人眼能感觉到的光称为可见光。400nm ~ 780 nm。
可见光区,不同波长的光呈现不同的有色,因此溶液的颜色由透射光的波长所决定。透射光与吸收光可组成白光——这两种光称为互补色光,两种颜色称为互补色。
由于物质的组成和结构不同,当一束白光通过一有色溶液时,溶液中的离子和分子对不
同波长的光具有选择性的吸收,而使溶液呈现不同的颜色。
2.吸收光谱产生原理:物质对光的选择性吸收
M + 热
M + 荧光或磷光
不同物质由于其组成和结构不同而具有不同的量子化能级,其能量差也不同,所以不同物质对不同波长光的吸收具有选择性。
M + h M *
光的互补:蓝 黄
基态 激发态
E1 (△E) E2
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可见分光光度法分析测定过程:
光源 →单色器 → 吸收池(比色皿) → 检测系统
0.5 , 1 , 2 , 3 , 5 cm
待测试样
λ/ nm
A
吸
光
度
λmax
以吸光度A为纵坐标,吸收波长λ为横坐标作图,
---吸收曲线
它能更清楚地描述
物质对光的吸收情况
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3. 吸收曲线
将不同波长 λ 的光透过某一固定浓度和厚度的有色溶液,测量每一波长有色溶液对光的吸收程度(吸光度 A)。
λ-----横坐标, A-----纵坐标-----作图------吸收曲线。
吸收曲线的讨论:
(1)同一种物质对不同波长光的吸光度不同。
吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长 λmax
(2)不同浓度的同一种物质,其吸收曲线形状
相似 λmax 不变。而对于不同物质,它们的吸收曲