内容正文:
专题09 生物技术与工程
目录
第一部分 知识提升
01 重难专攻(10大重难点)
02 易错辨析(4大易错点)
03 技巧点拨(1大解题技巧)
第二部分 限时检测
模拟考场,60分钟专练
第一部分 知识提升
★重难点01:消毒和灭菌的区别
比较项目
条件
结果
常用方法
应用范围
消毒
采用较温和的理化条件
仅杀死物体内外一部分对人体或动植物有害的病原菌,但对被消毒的对象基本无害
煮沸消毒法
耐高温的液体或物品,家庭餐具等生活用品
巴氏消毒法
牛奶、啤酒、果酒和酱油等不耐高温的液体
化学药物消毒法
皮肤、伤口、动植物组织表面消毒、空气、手术器械、塑料或玻璃器皿等
灭菌
强烈的理化方法
采用强烈的理化条件使物体内外的一切微生物(包括芽孢)丧失其生长繁殖能力的措施
高温灭菌
高压蒸汽灭菌(高压蒸汽灭菌锅:0.1 MPa ,121 ℃,20~30 min)可杀死一切微生物及孢子或芽孢
培养基、无菌水、玻璃容器等
干热灭菌:
①火焰灼烧;②烘箱干燥灭菌
涂布器、接种环、接种针或其他金属用具、试管口或瓶口等
过滤灭菌
含有热敏感物质(如尿素)的培养基以及好氧发酵所需的无菌空气
辐射灭菌
对物体表面和空气的灭菌。
紫外辐射
超净工作台内部和无菌室等。
其他操作:
为了确保微生物实验操作过程中不污染杂菌,还需要人为提供一个无菌区域。
①进行微生物实验操作时,操作者的衣着和手需进行清洁和消毒;
②实验结束时,也一定要洗手,以防止被微生物感染。使用后的培养基丢弃前,一定要进行灭菌处理,以免污染环境。
★重难点02:两种纯化方法的比较
项目
平板划线法
稀释涂布平板法
目的
在培养基上形成由单个菌体繁殖而来的子细胞群体--(单菌落)
分离结果
关键操作
接种环在固体培养基表面连续划线
①外面进行一系列的梯度稀释;
②在进行涂布平板操作
用具
接种环
移液器、涂布棒
优点
可以观察菌落特征,对混合菌进行分离;操作简单
可以计数(计数结果可能会偏低,需多次试验),可以观察菌落特征
能否用于计数
不能计数(连成一片)
可以计数,操作复杂,需要涂布多个平板
共同点
都要用到固体培养基;都需进行无菌操作;都会在培养基表面形成单个的菌落;都可用于观察菌落特征
★重难点03:测定微生物数量可间接了解微生物的生长情况
测定微生物细胞数量可以间接了解微生物的生长状况,常用方法是稀释涂布平板法和显微镜计数法。
方法
稀释涂布平板法(间接计数法)
显微镜计数法(直接计数法)
原理
稀释涂布平板法也可以用来进行活菌计数。
利用血细胞计数板在显微镜下直接观察微生物细胞并进行计数的方法
计数过程
该方法将待测菌液经适当稀释,涂布在平板上,经培养形成菌落后,统计菌落数。由于一个单菌落是由原样品中一个活的菌体细胞生长繁殖而成,因此,通过统计菌落数并根据其稀释倍数和取样量,可换算出单位样品中的活菌数。为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。
将菌液充满计数室,通过对微生物数量的读取,计算原菌液中的微生物数量。
优点
能进行活细胞计数
具有直观、简便和快速的优点,适用于个体相对较大的酵母细胞和霉菌孢子等微生物的计数
缺点
统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。
测得的是所有细胞的总数,不能区别死细胞或活细胞;
对运动能力强的活细胞也难以计数
★重难点04:植物组织培养和植物细胞培养的比较
比较项目
植物组织培养
植物细胞培养
目的
获得植物体
获得细胞产物
原理
植物细胞的全能性
细胞增殖
过程
应用
快速繁殖、作物脱毒、单倍体育种等
细胞产物的工厂化生产,如紫草宁、人参皂苷、紫杉醇等
★重难点05:植物组织培养与动物细胞培养的比较
植物组织培养
动物细胞培养
原理
细胞全能性
细胞增殖和生长
培养基物理状态
固体培养基
液体培养基
培养结果
植物体
细胞
培养目的
快速繁殖、培育无病毒植株等
获得细胞或细胞产物
过程
外植体
↓脱分化
愈伤组织
↓再分化
芽、根或胚状体
↓生长发育
植物体
动物的组织
↓机械法或酶
单个细胞
↓
原代培养
↓
传代培养
相同点
①两技术手段培养过程中都进行有丝分裂,都不涉及减数分裂;
②均需要无菌操作、无菌培养,需要适宜的温度、pH等条件
★重难点06:杂交瘤细胞两次筛选的原因
项目
第一次筛选
第二次筛选
筛选原因
诱导融合后会得到多种杂交细胞,另外还有未融合的细胞
由于小鼠在