内容正文:
生物技术与工程
发酵工程
基因工程
重组DNA技术的基本工具
传统发酵技术的应用
选择性必修3《生物技术与工程》
细胞工程
生物技术的安全性与伦理问题
微生物的培养技术及应用
动物细胞工程
植物细胞工程
基因工程的基本操作程序
基因工程的运用
蛋白质工程的原理和应用
转基因产品的安全性
发酵工程及其应用
胚胎工程
关注生殖性克隆人、禁止生物武器
第1章 发酵工程
Chapter 1 fermentation engineering
第1章 发酵工程
第2节 微生物的培养技术及应用
(第三课时)
目标
01
02
03
通过对土壤中分解尿素的细菌进行分离和计数,理解并掌握微生物计数的方法。(科学探究)
通过实例,理解各类微生物都能适应其生活环境。(生命观念)
根据微生物的代谢类型,配制选择培养基,总结分离微生物的过程和测定微生物数量的常用方法。(科学思维)
学习目标
4
温故知新:酵母菌的纯培养
酵母菌的纯培养
2.接种和分离酵母菌
1.制备培养基
3.培养酵母菌
①配制培养基(马铃薯、葡萄糖、琼脂、水)
②灭菌
③倒平板(在酒精灯火焰附近操作)
培养基:湿热灭菌(高压蒸汽灭菌锅)
培养皿:干热灭菌(干热灭菌锅)
用接种环在固体培养基上用平板划线法接种
平板倒置,放入28℃左右的恒温培养箱培养
问题1:自然界中微生物数量繁多,种类庞杂,要想从中分离出需要的特定微生物并不容易,尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时,仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。该怎么办呢?
选择培养基应运而生。
目录
CONTENTS
微生物的选择培养
2/
选择培养基
1/
微生物的数量测定
3/
土壤中分解尿素细菌的分离与计数
4/
01
选择培养基
一、选择培养基
寻找耐高温的DNA聚合酶
PCR是一种在体外DNA复制的技术,此项技术要求使用耐高温(930C)的DNA聚合酶。
(一)科学实例:
黄石公园(视频)
1.筛选原因:
水生栖热菌能在70-80℃高温条件下生存,而绝大多数微生物在此条件下不能生存。
耐高温的酶
耐高温生物体
高温环境(热泉、火山口)
寻找
寻找
2.筛选思路:
一、选择培养基
(一)科学实例:
寻找耐高温的DNA聚合酶
3.启示:
寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。
耐寒微生物
耐热微生物
石油分解菌
问题2:这对在实验室中选择培养特定的微生物有什么启示?如何筛选?什么是选择培养基?
一、选择培养基
(二)实验室中微生物筛选的原理:
人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度和pH等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。
(三)概念:
在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。
加入青霉素的培养基
不加氮源的无氮培养基
不加含碳有机物的无碳培养基
分离自养型微生物
分离固氮菌
分离酵母菌、霉菌等真菌
分离金黄色葡萄球菌
分离能消除石油污染的微生物
加高浓度食盐
石油是唯一碳源
一、选择培养基
项目 选择培养基 鉴别培养基
原理
用途
举例
图示
加入不影响甚至促进目标微生物生长,而抑制或阻止其他种类微生物生长的化学物质
加入某种指示剂或化学药品(不影响微生物正常生长),使微生物的某种代谢产物与培养基中的特定指示剂或化学药品发生反应
培养、分离出目标微生物
鉴别目标微生物
培养酵母菌和霉菌时,可在培养基中加入青霉素,抑制细菌的生长;利用以尿素为唯一氮源的培养基来培养可分解尿素的细菌
可用伊红美蓝培养基鉴定饮用水或乳制品中是否含有大肠杆菌(若有,则菌落呈黑色)
选择培养基与鉴别培养基的比较
+氨苄青霉素
具有抗氨苄青霉素能力的菌落
没有氨苄青霉素抗性的细菌
选择培养基
培养基+氨苄青霉素
培养基
没有抗氨苄青霉素能力的菌落被淘汰
怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌?
一、选择培养基
问题3:怎么证明一个选择培养基具有选择性呢?
应该设置基础培养基(如牛肉膏蛋白胨培养基)或完全培养基作为对照,若基础培养基或完全培养基中生长的菌落数菌多于该选择培养基,则该选择培养基具有选择性。
基础培养基
选择培养基
一、选择培养基
问题4:怎么证明一个选择培养基具有选择性呢?
问题5:如果想知道1g土壤中有多少能分解尿素的细菌,仅有选择培养基能实现吗?
2
3
1
一、选择培养基
合作探究一:请同学们自主学习教材P16页,小组合作思考讨论完成问题。
如果让你配制一种培养基,将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来,培养基的配方该如何设计?
该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点?
由于土壤细菌的数量庞大,怎么获得要想得到特定微生物的纯培养物呢?
一、选择培养基
选择培