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考点一 植物细胞工程的基本技术 考点二 植物细胞工程的应用 第37课 植物细胞工程 考点一 植物细胞工程的基本技术 (1)原理和方法:应用 、 和 等多学科的原理和方法。 (2)操作水平: 水平、 水平或 水平。 (3)目的:获得特定的 。 细胞生物学 分子生物学 发育生物学 细胞器 细胞 组织 细胞、组织、器官、个体或其产品 1.细胞工程的概念 P31 (4)分类 植物细胞工程 动物细胞工程 植物组织培养技术 植物体细胞杂交技术 植物细胞的全能性 植物细胞的全能性 细胞膜的流动性 原因:生物体的每个细胞中都含有发育成完整个体所需的全套基因 条件:离体、营养物质、激素、适宜的温度和pH 1、实验原理: 植物细胞具有全能性 2、基本过程: ①消毒灭菌 ②取材(形成层) ③接种到“诱导培养基”上 脱分化 ④接种到“分化培养基”上 ⑤移栽 再分化 愈伤组织 或胚状体 幼根和芽 外植体 完整植株 (离体的植物器官、组织或细胞) 发育 移栽成活 二.植物组织培养技术 P35 P342 脱分化 再分化 脱分化 让已经分化的细胞,经过激素诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。 愈伤组织 排列疏松无规则,无定形状态,高度液泡化的薄壁细胞。 注意:无叶绿体,可进行有丝分裂 适温、避光 见光后愈伤组织形成维管组织,变为绿色 脱分化形成愈伤组织是需要避光的,如果有光怎么办呢,就会形成维管组织,不利于愈伤组织的形成,形成愈伤组织后,再分化要进行光照条件,因为愈伤组织进一步发育成胚状体和丛芽过程中,需要合成叶绿素,合成叶绿素就需要光照,所以再分化的过程中,我们需要进行光照。 再分化 脱分化产生的愈伤组织在一定培养条件下再分化成幼根和芽,或胚状体,进而形成小植株的过程。 ①实质 _ ②结果_ _ ③光照条件:_ 为什么?_ ④过程中涉及的生命活动 _ 基因的选择性表达 再分化芽、根等器官,或再分化成胚状体后长出芽和根,进而发育成完整的植株 需要给予适当时间和强度的光照 诱导叶绿素的合成,使试管苗能够进行光合作用 既有细胞增殖(有丝分裂),又有细胞分化 适宜的激素比例 生长素和细胞分裂素的比例和浓度都会影响植物细胞的发育方向 细胞分裂素 生长素 低 利于芽的分化 高 利于根的分化 适中 利于愈伤组织的形成 P116 ①碳源:蔗糖 ②主要氮源:NH4NO3、KNO3 ③肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素属维生素类 肌醇:参与细胞壁及细胞膜的构建,促进胚状体和芽的形成 烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素:辅酶,参与各种代谢,促进生长分化 ④甘氨酸:很多氨基酸体内合成的前体物、促进离体根的生长 实例: 菊花的组织培养 提供能量,调节渗透压 酒精消 毒30s 1.外植体的消毒 P36 材料: 幼嫩的菊花茎段 流水 冲洗 次氯酸钠溶 液处理30min 无菌水清 洗2~3次 无菌水清 洗2~3次 2.外植体的切段 P36 用解剖刀将外植体切成0.5~1cm长的小段 将消过毒的外植体置于无菌培养皿中 用无菌滤纸吸去表面的水分 在酒精灯火焰旁,将外植体的1/3~1/2插入诱导愈伤组织的培养基中 注意:接种时注意外植体的方向,不要倒插! (将“形态学上端”朝上,下端朝下) 3.接种外植体 P36 用封口膜或瓶盖封盖瓶口,并在培养瓶上作好标记 无菌操作 4.诱导愈伤组织 P37 将接种了外植体的锥形瓶置于18-22 的培养箱培养 脱分化 定期观察愈伤组织的生长情况 培养基及培养条件: 激素比例1:1、置于黑暗、提供有机碳源(蔗糖) 培养15~20d后,将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽的培养基上 注意顺序,先诱导生芽,再诱导生根;该过程每日需要给予适当时间和强度的光照! 5.诱导生芽生根 P37 长出芽后,将其转接到诱导生根的培养基上,进一步诱导形成试管苗。 6.移栽 P37 移栽前先打开封口膜或瓶盖,让试管苗在培养箱内生长几日 用流水清洗掉根部的培养基 将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中,待其长壮后再移栽入土。 (2022 浙江6月选考)下列关于菊花组织培养的叙述,正确的是( ) A.用自然生长的茎进行组培(组织培养)须用适宜浓度的乙醇和次氯酸钠的混合液消毒 B.培养瓶用专用封口膜封口可防止外界杂菌侵入并阻止瓶内外的气体交换 C.组培苗锻炼时采用蛭石作为栽培基质的原因是蛭石带菌量低且营养丰富 D.不带叶片的菊花茎切段可以通过器官发生的途径形成完整的菊花植株 D 若细胞不离体,细胞中的基因会选择性地表达,从而形成生物体的不同组织和器官,不能表现出全能性; 【归纳】植物组织培养中细胞表现出全能性的条件 (1)离体(最关键): (2)严格的无菌条件: ① 对操作环境、双手、外植体进行消毒; ② 对培养基和器械进行灭菌; ③ 接种操作必须在酒精灯火焰旁进行; (