2.3 血涂片制备与染色（课件）-《兽医临床诊疗技术》同步教学（高教版）

2.3 血涂片制备与染色 主要内容 一、血液涂片制备 二、血液涂片染色 三、血涂片镜检 一、血涂片制备 血涂片显微镜检验，是血液细胞学检验的基本方法，良好的血涂片和染色是血液形态学检验的前提 。 一张良好的血涂片，厚薄要适宜，头体尾要明显，细胞分布要均匀，血膜边缘要整齐，并留有一定空隙。 材料——玻片 血涂片制作 1、滴一小滴血液在载玻片的一端。 2、另取一载玻片作为推片，将推片与前一张载玻片呈30-45℃角度，然后从前往后滑动，靠近小滴血。 3、在吸引力的作用，血滴分布到推片边缘，当血液均匀地分布在推片的边缘时，再匀速平稳地推片，推出均匀的血膜。 要求：血膜均匀、薄如蝉翼，尾端形如弧状，血膜具有头、体、尾不同厚薄区域。 4、血涂片的干燥 5、做标记 二、血涂片染色 为了观察细胞内部结构，识别各种细胞及其异常变化，要将血涂片进行染色。 1、血涂片染色方法 瑞氏染色法 姬姆萨染色法 瑞-姬氏复合染色法 材料——染色液 2、血涂片染色 染色过程（见视频） 三、血涂片镜检 血涂片染色干燥后，我们就可以进行血涂片的显微镜观察了。 （一）观察方法 1、低倍镜找视野 显微镜观察，先在低倍下找到要观察的视野，然后物镜选择由低倍到高倍。 2、高倍镜下分类计数 选择：血膜体尾交界处的细胞进行油镜观察 分类观察时：按弓字形走向，不要重复计数，如图示。 （二）观察内容 细胞种类 1、红细胞 2、白细胞 3、血小板 1、红细胞 呈双凹圆盘状，中央较薄，周缘较厚。红细胞的这种形态使它具有较大的表面积，同时使细胞内的每一点都不至于离细胞表面太远，有利气体交换。成熟的红细胞无核、无细胞器，胞质内充满大量的血红蛋白。 生成原料 红细胞生成除要求骨髓造血功能正常之外，还要有足够的造血原料。     制造红细胞的主要原料为蛋白质和二价铁，也要有适量的维生素B12、叶酸等辅助物质，促进红细胞发育成熟。此外，红细胞生成还需要维生素B2、 B6、C、E以及微量元素铜、锰、钴、锌等。 淡红色，大多哺乳动物红细胞是： 无核的圆盘状红细胞 骆驼红细胞：呈梭形或椭圆形，与家禽的红细胞相似，但没有细胞核。 家禽红细胞：呈梭形或椭圆形，有核 异常红细胞 网织红细胞：为刚从骨髓进入血液的新生红细胞，其内常有少量的残留核糖体，易被煌焦油蓝染色成蓝色小粒或小网。 2、白细胞 白细胞，为有核细胞,在视野中数量较少。 白细胞 无粒白细胞 有粒白细胞 嗜中性白细胞 嗜酸性白细胞 嗜碱性白细胞 单核细胞 淋巴细胞 白细胞分类辨别 嗜中性白细胞 嗜酸性白细胞 嗜碱性白细胞 淋巴细胞 单核细胞 3、血小板 表面有完整的细胞膜，无细胞核。血小板体积小，呈双凸圆盘状，易受机械、化学刺激，此时便伸出突起，呈不规则形。在血涂片中，血小板常呈多角形，聚集成群。血小板周围呈透明的浅蓝色，称透明区；中央部分有紫蓝色颗粒，称颗粒区。 $$