10.3定性和定量分析（课件）- 《分析化学》同步教学（暨南大学版）

第十章 紫外-可见分光光度法 第三节 定性和定量分析 一、定性分析 二、定量分析 2024/1/14 第五节 定性和定量分析 一、定性分析 二、定量分析 定性鉴别 纯度检查和杂质限量测定 单组分的定量方法 多组分的定量方法 2024/1/14 一、定性分析 （一）定性鉴别 (P199) 定性鉴别的依据→吸收光谱的特征 吸收光谱的形状 吸收峰的数目 吸收峰的位置（波长） 吸收峰的强度 相应的吸光系数 2024/1/14 1．对比吸收光谱的一致性 同一测定条件下， 与标准对照物谱图或标准谱图 进行对照比较 2024/1/14 2．对比吸收光谱的特征值 2024/1/14 3．对比吸光度或吸光系数的比值： 例： 2024/1/14 （二）纯度检查和杂质限量测定 1．纯度检查（杂质检查）(P200) (1) 峰位不重叠： 找λ→使主成分无吸收，杂质有吸收→直接考察杂质含量 (2)峰位重叠： 主成分强吸收，杂质无吸收 / 弱吸收→与纯品比较，E↓ 杂质强吸收 >> 主成分吸收→与纯品比较，E↑，光谱变形 2024/1/14 2．杂质限量的测定： 例：肾上腺素中微量杂质——肾上腺酮含量计算 2mg/mL -0.05mol/L的HCl溶液，λ 310nm下测定 规定 A310≤0.05 即符合要求的杂质限量≤0.06% 2024/1/14 二、定量分析 （一）单组分的定量方法 1．吸光系数法 2．标准曲线法 3．对照法：外标一点法 2024/1/14 1．吸光系数法 (P201) 2024/1/14 例：维生素B12 的水溶液在361 nm处的百分吸光系数为207，用1cm比色池测得某维生素B12溶液的吸光度是0.414，求该溶液的浓度 解： 2024/1/14 例：精密称取B12样品25.0 mg，用水溶液配成100 ml。精密吸取10.00 ml，又置100 ml容量瓶中，加水至刻度。取此溶液在1cm的吸收池中，于361 nm处测定吸光度为0.507，求B12的百分含量(B12的百分吸光系数为207) 解： 2024/1/14 例： 解： 2024/1/14 2．标准曲线法 (P202) 标准曲线法需要配制一系列标准溶液 2024/1/14 例：芦丁含量测定 0.710mg/25mL 2024/1/14 3．对照法：外标一点法 (P202） 注：当样品溶液与标准品溶液的 稀释倍数相同时 对照法只需要配制标准溶液和试样溶液 2024/1/14 例： 维生素B12的含量测定 精密吸取B12注射液2.50ml，加水稀释至10.00ml；另配制对照液，精密称定对照品25.00mg，加水稀释至1000ml。在361nm处，用1cm吸收池，分别测定吸光度为0.508和0.518，求B12注射液注射液的浓度以及标示量的百分含量（该B12注射液的标示量为100μg / mL） 解： (1) 对照法 2024/1/14 (2) 吸光系数法 2024/1/14 （二）多组分的定量方法 (P203) 三种情况： 1．两组分吸收光谱不重叠（互不干扰） 两组分在各自λmax下不重叠→分别按单组分定量 2024/1/14 2．两组分吸收光谱部分重叠 λ1→测A1→b组分不干扰→可按单组分定量测Ca λ2→测A2→a组分干扰→不能按单组分定量测Ca 2024/1/14 3．两组分吸收光谱完全重叠——混合样品测定 (1) 解线性方程组法 (2) 等吸收双波长消去法 (3) 系数倍率法 2024/1/14 1．解线性方程组法 步骤： 2024/1/14 2．等吸收双波长法 步骤： 消除a的影响测b 2024/1/14 消去b的影响测a 注：须满足两个基本条件 选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点 选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大 2024/1/14 3．系数倍率法 前提：干扰组分b不成峰形 无等吸收点 2024/1/14 步骤：b曲线上任找一点→λ1 另一点→λ2 优点：同时将待测组分和干扰组分放大信号K倍， 提高了待测组分测定灵敏度 a b λ1 λ2 2024/1/14 解： 例：取咖啡酸，在165℃干燥至恒重，精密称取10.00 mg，加少量 乙醇溶解，转移至200 ml容量瓶中，加水至刻度线，取此溶 液5.00ml，置于50 ml容量瓶中，加6 mol/l的HCl 4ml，加 水至刻度线。取此溶液于1 cm比色池中，在323 nm处测定吸 光度为0.463，已知该波长