第九章 紫外一可见分光光度法（课件）《分析化学基础》第一课时同步教学（人卫版供医学检验技术专业用第3版）

紫外-可见分光光度法 1 Ultraviolet Light (200～380nm) + Visible Light (380～800nm) 2 Ultraviolet & Visible Spectrophotometry (UV-Vis) 3 紫外-可见分光光度法 四大光谱之一 灵敏度较高(10-6g/ml) 应用广泛 定量分析(定性鉴别, 结构鉴定) 4 对乙酰氨基酚 阿替洛尔 青蒿素 鱼肝油 维生素A、维生素B2、维生素B12 …… 5 “In many applications, other techniques could be employed but none rival UV-Vis spectrophotometry for its simplicity, versatility, speed, accuracy and cost-effectiveness”. ——Principles of Instrumental Analysis 6 What is UV-Vis spectrophotometry? Basic principles of UV-Vis? How UV-Vis is applied in quantitative analysis? 7 What is UV-Vis spectrophotometry? Basic principles of UV-Vis? How UV-Vis is applied in quantitative analysis? 8 样 品 I I0 透光率(transmittance, T) T = I I0 透射光强 入射光强 9 样 品 吸光度(absorbance, A) I I0 A = -lgT = -lg I I0 10 吸收光谱 (absorption spectrum) 1 1 (nm) 吸 光 度 (A) 1 2 3 4 5 6 … n 1 2 3 4 5 6 … n 1 2 3 4 5 6 … n 11 末端吸收 (end absorption) 肩峰(shoulder peak) 吸收峰(peak) 谷(valley) 12 What is UV-Vis spectrophotometry? Basic principles of UV-Vis? How UV-Vis is applied in quantitative analysis? 13 样 品 I I0 ? 14 Absorption Incoming photon is absorbed by the atom 15  orbital *orbital  orbital * orbital n (p) electron 16 Electronic transitions * >n* *> n* anti-bonding * * n* n*   n * * anti-bonding bonding non-bonding bonding E 17 跃迁类型 峰位 强弱 分子基团 举例 * <150nm 弱 饱和烃类 CH3-CH3 (max=135nm) n* -200nm 较强 含-OH, -NH2 CH3Cl -X,-S等 (max=215nm =140) * -200nm 强 含不饱和键 CH2=CH2 分子 (max=165nm =10-4) n* 200-400nm 较弱 含有杂原子 丙酮 不饱和基团 (max=279nm =10-30)   18 常用术语 生色团(chromophore) ：有机化合物分子结构中含有*或n*跃迁的基团，能在紫外可见光范围内产生吸收的原子团。(如–C=C–) 助色团(auxochrome) ：含有非键电子的杂原子饱和基团，当它们与生色团或饱和烃相连时，能使该生色团或饱和烃的吸收峰向长波方向移动，并使吸收强度增加的基团。 (如–OH, –X) 19 红移(red shift)：亦称长移，由于化合物的结构改变，如发生共轭作用，引入助色团以及溶剂改变等，使吸收峰向长波方向移动。 蓝(紫)移(blue shift)：亦称短移，当化合物的结构改变或受溶剂影响使吸收峰向短波方向移动。 20 增色效