19平面色谱法（课件）- 《分析化学》同步教学（沈阳药科版）

第十九章 平面色谱法 在平面上进行分离的一种色谱方法。 纸色谱法　 薄层色谱法 第一节平面色谱法的分类和原理 一、平面色谱法的分类 　　薄层色谱法： 吸附薄层色谱法 分配薄层色谱法 　　纸色谱法 　　薄层电泳法 ①定性参数 比移值 Rf =L/L0 （0~1） Rf =1（固定相不吸附组分） Rf =0，在原点不动 一般：0.2~0.8 0.3~0.5最佳 二、平面色谱法参数 相对比移值（Rr) Rr = Rf (i)/Rf (s)=L(i)/L(s) Rr值可以大于1，也可以小于1。 重现性比Rf值好（有参考物质） ②相平衡参数 分配系数K= Cs/Cm 容量因子 k=C sVs/CmVm K、k与Rf值的关系： 　　　　　 K或K大组分，比移值小 第二节　薄层色谱法（TLC) 1.操作过程 制板-活化-点样-展开-显色-定性定量 2.吸附薄层色谱法 　　原理：固定相对组分有吸附作用 　　极性强的组分K大，Rf值小；极性弱的组分…… 吸附剂 硅胶 （1）含硅醇基，呈弱酸性 （2）原理：硅醇基(吸附中心)与极性基团形成氢键 （3）应用：分离酸性和中性物质 （4） 活度：含水量高，活性级高，活度低 （5）活化：加热至100℃左右，除去吸附水提高活度 （6）常用硅胶： 硅胶H，不含黏合剂 硅胶G，含煅石膏 硅胶GF254 含煅石膏和一种无机荧光剂， 氧化铝 （1）活度也与含水量有关 （2）有碱性、中性、酸性氧化铝 （3）同硅胶，分为Ⅰ -Ⅴ 级 活性高-低 吸附色谱展开剂(流动相) 极性强的溶剂洗脱能力强 常用溶剂的极性强弱顺序： 　　水＞酸＞吡啶＞甲醇＞乙醇＞正丙醇＞丙酮＞乙酸乙酯＞乙醚＞氯仿＞二氯甲烷＞甲苯＞苯＞三氯乙烷＞四氯化碳>环己烷>石油醚 展开剂 选择原则：根据被分离物质的极性 极性物质—活度低（活性级大）的吸附剂-极性展开剂 　 看教材图19-3 混合溶剂作展开剂 先用单一溶剂展开， 若Rf值太小，则加入一定量极性强的溶剂，如乙醇、丙酮等， 如果Rf值太大，则加入适量极性弱的溶剂(如环己烷、石油醚等)，以降低极性。 可加入一定比例的酸或碱,使斑点集中。 3. 分配薄层色谱法 原理：多次分配的过程，分配系数（溶解度）不等是实现分离前提 分类：正相色谱、反相色谱 正相色谱：水为固定相（硅胶载体），有机溶剂为流动相（硅胶含17%水时，为分配色谱） 极性强的组分K大， Rf值小。 反相色谱：烷基化学键合相为固定相，水－有机溶剂为流动相。极性强的组分K小， Rf值大。 4.定性和定量分析 定性分析 比较Rf值 定量分析　 　洗脱法 　直接定量法 　　　　目视比较法 　　　　薄层扫描法 第三节　纸色谱法 一、分离原理 纸纤维为载体，吸着在上面水为固定相 属于正相分配色谱 极性或亲水性强的组分，K大，Rf值小，反之……。 二、纸色谱法的实验条件 1.色谱纸的选择 对Rf值相差很小的化合物，宜采用慢速滤纸 对Rf值相差较大的化合物，则可用快速滤纸 2.固定相　 水或甲酰胺、二甲基甲酰胺、丙二醇或缓冲溶液。（酸、碱） 3.展开剂的选择　增加展开剂中极性，增大Rf值；增加展开剂非极性，减小Rf值。 常用的展开剂　水饱和的有机溶剂，如水饱和的正丁醇、正戊醇、酚等 4.操作步骤 点样、展开、显色、定性定量分析 $$