16色谱分析法概论（课件）- 《分析化学》同步教学（吉林大学版）

第16章 色谱分析法概论 上一内容 下一内容 回主目录 返回 11 一月 2024 93-2 本章内容概览 16.0 色谱概述 16.1 色谱分离过程和基本原理 16.2 基本类型色谱法及其分离机理 16.3 色谱法基本理论 16.4 色谱法发展概况 上一内容 下一内容 回主目录 返回 11 一月 2024 93-3 16.0 色谱法概述 上一内容 下一内容 回主目录 返回 11 一月 2024 93-4 特点： 高灵敏度：可实现 ng 级的检测 高选择性：可实现同分异构体、对映异构体的构象分离 高效能： 快速、微量、在线分析 应用广泛：集分离、定性与定量于一体。 地位与作用：十分关键，无法替代 药物分析：各国药典收载了许多色谱分析方法。中国药典2010版二部700多，一部600多。 一、色谱方法的特点、地位和作用 上一内容 下一内容 回主目录 返回 11 一月 2024 93-5 2010中国药典二部（中药与中成药）鉴别项 显微 TLC HPLC GC 理化 指纹图谱 2005年版收载总数 620 1507 16 16 298 1 2010年版新增 633 2492 31 12 134 22 2010年版收载总数 1253 3999 47 28 432 23 上一内容 下一内容 回主目录 返回 11 一月 2024 93-6 2010中国药典二部含量测定项 检测 方法 HPLC GC TLC-S UV 其他 2005版 收载 505 47 31 37 34 2010版 新增 1138 15 16 25 32 2010版 总数 1643 62 47 62 68 上一内容 下一内容 回主目录 返回 11 一月 2024 93-7 一、色谱分离基本原理和过程 1、色谱分离体系的构成：三要素一载体 16.1 色谱过程和基本原理 分离组分： 流动相：携带相应组分进行定向运动。 固定相：对不同组分产生不同的滞留作用。 载 体：承载固定相、约束流动相，并构成一定形状的运行空间和体系。 载体 固定相 组分 流动相 载体 固定相 组分 流动相 上一内容 下一内容 回主目录 返回 11 一月 2024 93-8 2、色谱分离的基本原理： 两相对组分施加对立统一的合力作用 组分不同，两相对其施加的合力不同，因此其运动速度不同，而相同组分基本一致，进而实现分离与富集。 16.1 色谱过程和基本原理 载体 固定相 组分 流动相 上一内容 下一内容 回主目录 返回 11 一月 2024 93-9 3、一般过程：构成+载样+运行+接收+得图 上一内容 下一内容 回主目录 返回 11 一月 2024 93-10 二、色谱流出曲线和相关概念 （一）色谱流出曲线——色谱图 检测信号强度对时间作图 基线、色谱峰 上一内容 下一内容 回主目录 返回 10 11 一月 2024 93-11 色谱峰数— 样品中单组份的最少个数； 色谱保留值— 定性与色谱评价； 色谱峰高或面积— 定量； 峰宽— 评价色谱柱分离效能； 峰间距— 评价固定相或流动相选择性。 色谱流出曲线及其意义 上一内容 下一内容 回主目录 返回 11 一月 2024 93-12 基线： 实验条件下仅有纯流动相进入检测器时的流出曲线称为基线。 意义：反映仪器的S⁄N 和稳定性 上一内容 下一内容 回主目录 返回 11 一月 2024 93-13 色谱峰 正态峰：正态分布 偏态峰：拖尾峰、前延峰 不对称因子： f s = W0.05h/2A=(A+B)/2A 0.95≤ f s ≤1.05 对称峰 f s＜0.95的是前延峰 f s＞1.05的是拖尾峰 为何会产生偏态峰？ 若产生正态峰需要什么条件？ 上一内容 下一内容 回主目录 返回 11 一月 2024 93-14 色谱分离等温线与正态峰 等温线的非线性程度、两相间传质阻力以及进料体积、浓度和流速等操作条件都将直接影响色谱峰的对称性 上一内容 下一内容 回主目录 返回 11 一月 2024 93-15 （二）保留值 1、定性参数一：时间参数 保留时间（retention time , tR）： 某组分从进样到柱后出现浓度（峰）极大值时的时间间隔。 保留时间是色谱法的基本定性参数，主要用于定距洗脱或展开。 定距洗脱或展开：记录组分通过一定长度的色谱空间所经历的时间； 定时洗脱或展开：记录组分在同一展开时间的迁移距离。 上一内容 下一内容 回主目录 返回 11 一月 2024 93-16 死时间（Dead time , t0） 与固定相无滞留作用的物质的保留时间。 它与色谱柱的空隙体积（死体积）成正比；其流速与流动相流速 u 相近： 上一内容 下一内