第10章 吸光光度法（2）（课件）- 《分析化学》同步教学（冶金工业版）

分析化学 Analytical Chemistry 第一章 绪论 第二章 定量分析的一般步骤 第三章 误差分析数据的统计处理 第四章 滴定分析 第五章 酸碱滴定法 第六章 配位滴定法 第七章 氧化还原滴定法 第八章 重量分析法和沉淀滴定法 第九章 电位分析法 第十章 吸光光度法 第十一章 原子吸收光谱法 目录 分析化学 10-1 吸光光度法基本原理 10-2 分光光度计及吸收光谱 10-3 显色反应及显色条件的选择 10-4 吸光度测量条件的选择 10-5 吸光光度法的应用 分析化学 一束平行单色光通过均匀、非散射的固体、液体或气体介质时，一部分被吸收，一部分透过介质，一部分被器皿的表面反射。设入射光强度为I0，吸收光强度为Ia，透过光强度为It 。 入射光 I0 透射光 It 透光率T： T越大，物质对光的吸收越小。 三、光的吸收基本定律—朗伯-比尔定律 分析化学 朗伯-比尔定律：当一束强度为I0的平行单色光垂直照射到长度为b、浓度为c的液层，通过溶液后光的强度为It ： 式中比例常数k与吸光物质的性质、入射光波长及温度等因素有关。 分析化学 吸光度 A 和透光率 T 的关系： 上式中比例常数 k 随c的单位不同而不同。同一吸收物质在不同波长下的 k 值是不同的。 分析化学 摩尔吸收系数k的含义 k 称为摩尔吸收系数，单位为L·mol-l·cm-1，它表示物质的量浓度为 l mol·L-1，液层厚度为 l cm时溶液的吸光度。 k是吸光物质在一定波长和物质中的特征常数，反映该吸光物质的灵敏度。k值越大，表示该吸光物质对此波长光的吸收能力越强，显色反应越灵敏，在最大吸收波长处的摩尔吸光系数常以kmax表示。 分析化学 桑德尔灵敏度S 仪器检测限为A=0.001时，单位截面积(cm2)光程内所含吸光物质的最低含量，其单位是 根据朗伯-比耳定律，k＝A/bc由实验结果计算以总浓度代替吸光物质的浓度，k为表观摩尔吸收系数，k=Ma，M是摩尔质量。 桑德尔（Sandell）灵敏度S μg·cm-2 , S=M / k 分析化学 k与灵敏度的关系 A A k = — 当b=1时： k = — ......标准曲线的斜率 b c c k '> k c一定：A' > A 当b c一定时，kA k =104--106 L·mol-1·cm-1 　高灵敏反应 在λmax处测A，有最大值 ε' ε A' A C c 分析化学 　影响k值大小的因素 (1)入射光波长 (2)与被测物质有关 (3)温度、酸度、介质、有色物结构 (4)k不随 c或A值变化 分析化学 吸光度A的加和性 　 定义：当一束单色光通过含有吸光物质的溶液后，溶液的吸光度A与吸光物质的浓度c及吸收层厚度成正比 。 　 　 　　　　 A1 b1 　　　　 　　若： c 一定时 — = — ... Lambert Law 　　 　　 A2 b2 　　 　　　　 A1 c1 　　　 　　　　b 一定时 — = — ... Beer's Law　 　 　 　 A2 c2 　 若溶液中含有不止一种吸光物质，则总浓度等于各个组分吸光度之和： A = A1+A2+... +An 分析化学 在吸光光度分析中，经常出现标准曲线不呈直线的情况，特别是当浓度较高时，标准曲线明显弯曲。 偏离朗伯-比尔定律主要原因： 偏离朗伯-比尔定律的原因 (1)非单色光引起的偏离 (2)溶液本身的化学和物理因素引起的偏离 (3)介质不均匀引起的偏离 分析化学 因物质对不同波长的光的吸收程度不同，而导致偏离 △A 1=A 1-A 2 △A 2=A 3-A 4 △A 1> △A 2 直线偏向 c 轴 　 所以：Beer’s Law 应在一 定的浓度范围内使用 k 1 不等于k 2不等于k 3 　　A不等于kbc