内容正文:
第3章 基因工程
第1节 重组 DNA 技术的基本工具
第1课时 重组 DNA 技术的基本工具(一)
胰岛素基因从人体细胞内提取出来
胰岛素基因与载体DNA连接
胰岛素基因导入大肠杆菌
培育能产生人胰岛素的大肠杆菌
大肠杆菌细胞
指按照人们的愿望, 通过转基因等技术,赋予生物新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫作DNA重组技术。
一、基因工程
1、概念:
一、基因工程
指按照人们的愿望, 通过转基因等技术,赋予生物新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫作DNA重组技术。
甲生物
取出优秀基因
“剪切”
“拼接”
乙生物
表达
新类型
新的生物产品
一、基因工程
1、概念:
别名
操作环境
操作对象
操作水平
基本过程
操作工具
结果
原 理
优 点
基因拼接技术或DNA重组技术
生物体外
基因
剪切→拼接→导入→表达
人类需要的新的生物类型和生物产品
2、对基因工程概念的理解
基因重组
克服远缘杂交不亲和障碍、定向改造生物性状
分子运输车、分子手术刀、分子缝合针
DNA分子水平
一、基因工程
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3、基因工程发展历程
1944年艾弗里等人通过肺炎链球菌的转化实验,不仅证明了遗传物质是DNA,还证明了DNA可以在同种生物个体间转移。
1961年尼伦伯格和马太破译了第一个编码氨基酸的密码子。截至1966年,64个密码子均被破译成功。
1970年科学家在细菌中发现了第一个限制性核酸内切酶(简称限制酶)
1972年,伯格首先在体外进行了DNA的改造,成功构建了第一个体外重组DNA分子。
1982年,第一个基因工程药物-重组人胰岛素被批准上市。基因工程药物成为世界各国研究和投资开发的热点。
1953年沃森和克里克建立了DNA双螺旋结构模型并提出了遗传物质自我复制的假说。
1967年,科学家发现,在细菌拟核DNA之外的质粒有自我复制能力,并可以在细菌细胞间转移。
20世纪70年代初,多种限制酶、DNA连接酶和逆转录酶被相继发现。这些发现为DNA的切割、连接以及功能基因的获得创造了条件。
1973年,科学家证明了质粒可以作为基因工程的载体,构建重组DNA,导入受体细胞,使外源基因在原核细胞中成功表达,并实现了物种间的基因交流。至此,基因工程正式问世。
1985年,穆里斯等人发明PCR,为获取目的基因提供了有效手段。
一、基因工程
(1)不同生物的基因为什么能拼接?
(2)外源基因为什么能在受体细胞中表达?
①DNA的基本组成单位都是四种脱氧核苷酸。
②都遵循碱基互补配对原则。
③双链DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构。
①基因是控制生物性状的独立遗传单位。
②遗传信息的传递都遵循中心法则。
③生物界共用一套遗传密码。
相同的遗传信息在不同的生物体内表达出相同的蛋白质。
4、基因工程的理论基础
一、基因工程
番木瓜容易受番木瓜环斑病毒的侵害。当番木瓜受到这种病毒感染后,产量会大大下降。科学家通过精心设计用“分子工具”培育出了转基因番木瓜,它可以抵御番木瓜环斑病毒。
DNA双螺旋的直径只有2nm,对如此微小的分子进行操作,是一项非常精细的工作,更需要专门的“分子工具”。那么,科学家究竟用到了哪些“分子工具”?这些“分子工具”各具有什么特征呢?
从社会中来
非转基因番木瓜
转基因番木瓜
胰岛素基因从人体细胞内提取出来
胰岛素基因与载体DNA连接
胰岛素基因导入受体细胞(大肠杆菌)
培育能产生人胰岛素的大肠杆菌
“分子手术刀”
“分子缝合针”
“分子运输车”
基因工程的基本工具
二、DNA重组技术的基本工具
二、DNA重组技术的基本工具
“分子手术刀”—— 限制性内切核酸酶
“分子缝合针”—— DNA连接酶
“分子运输车”—— 基因进入受体细胞的载体
三、限制性内切核酸酶
切割DNA分子的工具是限制性内切核酸酶,简称限制酶(又称基因剪刀)。
——“分子手术刀”
限制酶名字的由来:
限制酶的命名是根据细菌种类而定:用生物属名的头一个字母(大写)与种加词的头两个字母,组成了3个字母的略语,以此来表示这个酶是从哪种生物中分离出来的。必要时加上菌株的标志字母,如EcoRⅠ的R。最后,若由此菌株可以得到的限制性核酸酶不止一种,则按Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ编号。
EcoRⅠ:大肠杆菌(Escherichia coli)R型菌株中分离出的第一个限制酶;
SmaⅠ:粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)中分离出的第一个限制酶。
三、限制性内切核酸酶
——“分子手术刀”
1、来源:
主要从原核生物中分离纯化来的
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