2.2动物细胞工程 第1课时 动物细胞培养课件-2022-2023学年高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

第2章 细胞工程 第2节 动物细胞工程 第1课时 动物细胞培养　 在治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，而且会产生免疫排斥反应。 那么，怎样才能获得大量的自体健康皮肤？能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤？ 可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增； 人造皮肤 目前，科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养，以获得适合临床上使用的人造皮肤。 从社会中来 首例胚胎移植成功 1890年 首创动物组织体外培养法 1907年 发现哺乳动物精子获能现象 1951年 体细胞核移植成功 1958年 试管家兔诞生 1959年 创立单克隆抗体技术 1975年 胚胎分割移植成功 1978年 分离和培养小鼠胚胎干细胞 1981年 克隆羊多莉诞生 1996年 获得诱导多能干细胞 2006年 单细胞基因组测序进行遗传病筛查的试管婴儿诞生 2014年 我国科学家首次培育了体细胞克隆猴。 2017年 动物细胞工程的发展历程 3 动物细胞培养的概念 从动物体中取出相关组织，将它们分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 原理？ 细胞的分裂（增殖） 一、动物细胞培养的条件 动物细胞培养的地位 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞工程的基本技术 动物细胞融合 基础 动物体内的细胞之所以能够维持正常的生命活动，是因为机体给这些细胞提供了适宜的条件。你还记得有哪些条件吗？ 充足的营养 稳定的内环境 体外培养动物细胞需要满足什么条件？ 糖类、氨基酸、无机盐、维生素 …… 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 一、动物细胞培养的条件 将细胞所需的营养物质（糖类、氨基酸、无机盐、维生素等）按种类和所需量严格配制的培养基。 1、营养条件 （1）培养基构成： 合成培养基 血清等一些天然成分 ＋ 合成培养基： 血清等一些天然成分： 含有尚未全部研究清楚的细胞所需的营养物质 （2）培养基类型： 液体培养基 （培养液） 血清 一、动物细胞培养的条件 2、无菌、无毒的环境 （1）对培养液和所有培养用具进行灭菌处理。 （2）在无菌环境下进行操作。 （3）培养液需要定期更换： 以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。 另外：可根据实际情况适量添加抗生素。 无菌 无毒 一、动物细胞培养的条件 3、温度、pH和渗透压 （1）适宜的温度： 哺乳动物细胞培养的温度多以 为宜； 36.5±0.5℃ （2）适宜的pH： 多数动物细胞生存的适宜pH为 ； 7.2~7.4 （3）适宜的渗透压： 目的 。 维持细胞正常的形态和功能 与相应动物内环境的理化性质保持一致。 培养条件 人体内环境的理化性质 ①人体细胞外液的温度一般维持在： 36.5±0.5℃ ②正常人的血浆近中性，pH约为： 7.35~7.45 ③渗透压：指溶液中溶质微粒对水的吸引力。 在37℃时，人的血浆渗透压约为： 770 kPa 一、动物细胞培养的条件 4、气体环境 （1）气体组成及作用： 95%空气（O2）： 5%CO2： 细胞代谢所必需 维持培养液的pH （2）具体操作： 通常采用培养皿或松盖培养瓶。 置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养。 CO2培养箱 一、动物细胞培养的条件 培养皿 培养瓶 取动物组织 制成细胞悬液 转入培养液进行原代培养 分瓶 进行传代培养 取动物组织 制成细胞悬液 转入培养液进行原代培养 放入CO2培养箱中培养 传代培养 放入CO2培养箱中培养 细胞贴壁 接触抑制 机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理 分散成单个细胞 二、动物细胞培养的过程 1、取动物组织 （1）取材： 一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。 （2）取材原因： 细胞分化程度低，增殖能力强，容易培养。 动物相关组织的选择： 幼龄动物 or 老龄动物 二、动物细胞培养的过程 2、动物组织处理——制成细胞悬液 （1）将组织分散成单个细胞 ①方法： 机械法 用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间 ②原因： 成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长和增殖 一是能使细胞与培养液充分接触，保证细胞所需要的营养供应； （2）用培养液将细胞制成细胞悬液。 二是能保证细胞内有害代谢物的及时排出。 将细胞悬液放入培养皿或培养瓶内，置于适宜环境中进行原代培养。 二、动物细胞培养的过程 【问题探究1】进行动物细胞培养时常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶