2.1植物细胞工程 第2课时 探究?实践 菊花的组织培养课件-2022-2023学年高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

第2章 细胞工程 第1节 植物细胞工程 第2课时 探究•实践 菊花的组织培养 幼 苗 愈伤组织 脱分化 IAA/CTK比例适合 再分化 IAA/CTK 比例 先减小再增大 植物组织培养过程示意图 完整植株 外植体 课题背景——植物的组织培养 课题背景——细胞表现全能性的条件 （1）离体状态 （2）无菌操作（防止杂菌污染） （3）种类齐全、比例适合的营养物质 （4）植物激素（主要是生长素和细胞分裂素）诱导和调节 （5）适宜的外界条件（温度、pH、光照等） 1、原理： 外植体 愈伤组织 试管苗 完整植株 脱分化 芽、根等 再分化 生长 发育 植物细胞一般具有 。 全能性 生长素/细胞分裂素 结果 比值高(＞1) 比值低(＜1) 比值适中(=1) 有利于根的分化，抑制芽的形成 有利于芽的分化，抑制根的形成 促进愈伤组织的形成 简记为：“高”根，“低”芽，“中”愈伤 探究•实践 菊花的组织培养 2、目的： （1）了解植物组织培养的基本原理； （2）了解生长素和细胞分裂素的浓度、用量比例对菊花愈伤组织形成和分化的影响； （3）尝试进行植物组织培养。 3、材料用具： （1）材料：幼嫩的菊花茎段、培养基、体积分数为70%的酒精、质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液和无菌水等。 探究•实践 菊花的组织培养 （2）用具：50 mL锥形瓶（或植物组织培养瓶）、烧杯、酒精灯、超净工作台（或接种箱）、高压蒸汽灭菌锅、培养箱、封口膜、滤纸、标签、消毒用酒精棉球、培养皿、解剖刀和镊子等。 4、步骤： 接种 培养 试管苗 正常植株 用酒精擦拭双手和超净工作台台面。 流水充分冲洗外植体。 ②方法： ①材料： 幼嫩的菊花茎段 30S 酒精 2-3次 立即 无菌水洗 30min 次氯酸钠溶液 2-3次 立即 无菌水洗 （1）消毒： 既要考虑消毒效果，又要考虑植物的耐受力 两次用无菌水清洗的目的：将酒精和次氯酸钠溶液清洗干净 探究•实践 菊花的组织培养 消毒 消毒 接种 培养 试管苗 正常植株 在酒精灯火焰旁，将外植体的1/3 ~ 1/2插入诱导愈伤组织的培养基中； ③封盖和标记 （2）接种： 注意：接种时注意外植体的方向，不要倒插！ （将“形态学上端”朝上，下端朝下） ①切分外植体：无菌操作 将消过毒的外植体置于无菌的培养皿中，用无菌滤纸吸去表面的水分。用解剖刀将外植体切成0.5~1cm长的小段； 外植体切块 ②接种 用封口膜或瓶盖封盖瓶口，并在培养瓶上作好标记。 探究•实践 菊花的组织培养 接种 培养 试管苗 正常植株 脱分化 脱分化 形成愈伤组织 有光时，往往容易形成维管组织，而不易形成愈伤组织。 将接种了外植体的锥形瓶或植物组织培养瓶置于18~22℃的培养箱中培养。在培养过程中，定期观察和记录愈伤组织的生长情况。 避光 （3）培养愈伤组织： ①接种到诱导愈伤组织培养基 培养基及培养条件： 激素比例1：1、置于黑暗、 提供有机碳源（蔗糖） 探究•实践 菊花的组织培养 消毒 接种 培养 试管苗 正常植株 ②接种到诱导生芽培养基 ③接种到诱导生根培养基 培养15~20d后，将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽的培养基上。 若先生根后面就不易生芽，所以要注意顺序，该过程每日需要给予适当时间和强度的光照！ （3）培养： 长出芽后，再将其转接到诱导生根的培养基上，进一步诱导形成试管苗。 探究•实践 菊花的组织培养 消毒 接种 培养 试管苗 正常植株 （4）移栽： 移栽前先打开封口膜或瓶盖，让试管苗在培养箱内生长几日 用流水清洗掉根部的培养基 将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，待其长壮后再移栽入土。 每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花。 探究•实践 菊花的组织培养 消毒 5、注意事项： 探究•实践 菊花的组织培养 （1）实验中使用的培养基和所有的器械都要灭菌。接种操作必须在酒精灯火焰旁进行，并且每次使用后的器械都要灭菌。 （2）接种时注意外植体的方向，不要倒插。 （3）诱导愈伤组织期间一般不需要光照； 在后续的培养过程中，每日需要给予适当时间和强度的光照。 （4）培养离体植物组织常用的培养基——MS培养基 水（去离子水）、无机营养（大量元素、微量元素）、有机营养（蔗糖、维生素、氨基酸）、天然附加物、植物激素（生长素、细胞分裂素等） 诱导愈伤组织、诱导生芽和诱导生根的培养基成分有差别。 6、结果分析与评价： 用于植物组织培养的培养基同样适合某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。 （1）在植物组培过程中，为什