内容正文:
第2章 细胞工程
第1节 植物细胞工程
第1课时 植物细胞工程的基本技术
从社会中来
我国人民都把兰花看作高洁、典雅的象征,很多人喜欢养兰花,但是,兰花种子通常发育不全,在自然条件下萌发率极低;传统分株繁殖的方法又存在繁殖周期长、繁殖率低等问题,如果靠自然繁殖,兰花的价格可想而知了。
利用植物组织培养技术可以大量、快速地培育兰花。兰花是观赏植物中最常见的一类,依靠植物组织培养繁育种苗的植物,其组培苗的数量约占观赏植物组培苗总量的40%。
如何能让名贵的兰花大量、快速地繁殖,从而走入寻常百姓家呢?
细胞工程是指应用细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的原理和方法,通过细胞器、细胞或组织水平上的操作,有目的地获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合性的生物工程。
原理和方法
操作水平
目的
分类
细胞生物学、分子生物学和发育生物学
细胞器、细胞或组织
获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品
动物细胞工程和植物细胞工程
一、细胞工程
概念:
细胞经过 后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。
——植物细胞的全能性
2、具有全能性的原因:
一般生物体的每一个细胞都包含有该物种的 。即都有发育成 所必需的全部遗传信息。
全套遗传信息
完整个体
3、体现全能性的标志:
细胞→ 完整个体或其他各种细胞
实例:胡萝卜韧皮部细胞发育成完整植株
受精卵发育成个体(动植物)
蜜蜂受精卵发育成工蜂,卵细胞发育成雄峰
用一片叶子、一片花瓣、一粒花粉繁殖出新的植株
二、植物细胞工程的理论基础
1、定义:
分裂和分化
实例:芽原基只能发育为芽,叶原基只能发育为叶
4、生物体内细胞不体现全能性的原因:
基因在特定的时间和空间条件下 表达的结果。
选择性
5、全能性大小比较:
(1)分化程度低的 分化程度高的
(2)细胞分裂能力强的 细胞分裂能力弱
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(3)受精卵 胚胎干细胞 生殖细胞 体细胞
植物细胞 动物细胞
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——植物细胞的全能性
二、植物细胞工程的理论基础
1、植物细胞工程发展历程
哈伯兰特提出了细胞全能性的理论,但相关的实验尝试没有成功。
斯图尔德等发现胡萝卜的体细胞可以分化为胚,为细胞全能性理论提供了强有力的支持。
科金用真菌的纤维素酶分解番茄根的细胞壁,成功获得了原生质体。
古哈等在培养毛曼陀罗的花药时,首次得到了由花药中的花粉粒发育而来的胚。
卡尔森诱导烟草种间原生质体融合,获得了第一株体细胞种间杂种植株。
土壤农杆菌的Ti质粒被发现。之后,该质粒应用于植物分子生物学领域,促进了植物细胞工程与分子生物学技术的紧密结合。
1902年
1958年
1960年
1964年
1971年
1974年
三、植物细胞工程
2、植物细胞工程的基本技术
植物组织培养技术
植物体细胞杂交技术
三、植物细胞工程
2、一般过程:
外植体
愈伤组织
脱分化
芽、根等
再分化
试管苗
接种外植体
移栽成活
诱导愈伤组织
脱分化
诱导生芽
再分化
诱导生根
再分化
分化状态
未分化状态
四、植物组织培养技术
完整植株
生长
发育
1、定义:
指 的植物器官、组织或细胞等,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其分化为 的技术。
离体
完整植株
外植体
(无菌条件)
4、脱分化:
在一定的 和 等条件的 下, 的细胞
,转变成 ,进而形成愈伤组织的过程。
激素
营养
诱导
已经分化
失去其特有的结构和功能
未分化的细胞
(1)光照条件:
(2)过程中涉及的生命活动:
一般不需要光照
只有细胞增殖(有丝分裂),没有细胞分化
在植物组织培养过程中,从植物体上被分离下来的,接种在培养基上供培养用的原生质体、细胞、组织、器官等。
3、外植体:
四、植物组织培养技术
注意说明
①外植体脱分化的难易因植物种类、器官来源及生理状况的不同而不同。一般来说,植物的花和幼嫩的组织脱分化相对较易,而植物的茎、叶等成熟的组织脱分化则较难。
②该过程添加的外源激素主要是细胞分裂素和生长素(比例适中),因为二者能强烈地促进愈伤组织的形成。
(3)结果:
形成愈伤组织
③无菌操作——植物组织培养成功的关键。
4、脱分化:
四、植物组织培养技术
5、愈伤组织:
细胞排列疏松且无规则、高度