第八章 紫外 - 可见分光光度法（课件）- 《分析化学》第五课时同步教学（人卫版第9版）

一、定性分析 二、定量分析 定性鉴别 纯度检查和杂质限量测定 单组分的定量方法 多组分的定量方法 第四节 定性和定量分析 一、定性分析 （一）定性鉴别 依据：紫外可见光谱与化合物分子中含有的生色团和助色团有关→与分子中电子跃迁类型有关 吸收光谱的特征 吸收光谱的形状、吸收峰的数目、位置、强度 第四节 定性和定量分析 2 峰位与电子跃迁类型有关，峰强与跃迁几率有关 1．对比吸收光谱的特征数据 第四节 定性和定量分析 2．对比吸光度或吸光系数的比值 例： 第四节 定性和定量分析 3．对比吸收光谱的一致性 同一测定条件下，与标准对照物谱图或标准谱图，进行对照比较 第四节 定性和定量分析 （二）纯度检查和杂质限量测定 1．纯度检查（杂质检查） 1）峰位不重叠： 找λ→使主成分无吸收，杂质有吸收→直接考察杂质含量 2）峰位重叠： 主成分强吸收，杂质无吸收 / 弱吸收→与对照品比较，E↓ 杂质强吸收 >> 主成分吸收→与对照品比较，E↑，光谱变形 第四节 定性和定量分析 2．杂质限量的测定 例：肾上腺素中微量杂质——肾上腺酮含量计算 2mg/mL -0.05mol/L的HCL溶液，λ 310nm下测定 规定 A310≤0.05 即符合要求的杂质限量≤0.06% 第四节 定性和定量分析 二、定量分析 （一）单组分的定量方法  组分的测定波长必须大于溶剂的截止波长  选λmax作为测定波长（灵敏度↑， ΔE↓） 第四节 定性和定量分析 1．吸光系数法 注意单位！ 第四节 定性和定量分析 例： 解： 2．标准曲线法 第四节 定性和定量分析 芦丁含量测定 0.710mg/25mL 3．对照法：外标一点法 注：当样品溶液与标准品溶液的 稀释倍数相同时 （二）多组分的定量方法 三种情况： 1．两组分吸收光谱不重叠 两组分在各自λmax下不重叠→分别按单组分定量 2．两组分吸收光谱部分重叠 λ1→b组分不干扰→测A1 →可按单组分定量测Ca λ2→ a组分干扰→测A2→不能按单组分定量测Cb 第四节 定性和定量分析 单击此处编辑母版文本样式 第二级 第三级 第四级 第五级 3．两组分吸收光谱完全重叠——混合样品测定 （1）解线性方程组法 （2）等吸收双波长消去法 第四节 定性和定量分析 1．解线性方程组法 步骤： 2．双波长法 步骤： 波长选择原则： 选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点 选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大 第四节 定性和定量分析 消除a的影响测b 消去b的影响测a 第四节 定性和定量分析 一、定性分析 依据：光谱特征 1．对比吸收光谱的特征数据 2. 对比吸光度（或吸光系数）的比值 相同 第四节 定性与定量分析 3．对比吸收光谱的一致性 同一测定条件下，与标准品制成的图谱或标准谱图进行对照比较。 单击此处编辑母版文本样式 第二级 第三级 第四级 第五级 1.杂质检查 根据组分与杂质吸收特点： 组分无吸收，杂质有吸收（乙醇中苯的检查） 组分吸收强度>杂质吸收，有杂质则A和E降低 组分吸收强度<杂质吸收，有杂质则A和E增大 2.杂质的限量检查 肾上腺素（药物）中肾上腺酮（杂质）的检查： ＝310nm，杂质有吸收，药物无吸收。 二、纯度检查 药物用HCl溶液制成每1ml含2mg的溶液，于310nm处测定吸光度A值（1cm）。规定A不得超过0.05，药物E＝435。杂质限量为： 不超过0.06%。  组分的测定波长要大于溶剂的截止波长 1．吸光系数法 吸光系数E或є已知： 注意单位  三、单组分分的定量方法 例： 解： 2.校正曲线法 A对C曲线经原点，且Cs≈Cx 由：A=KC 配制系列浓度标准溶液C1，C2，C3… 测A1，A2，A3… A对C作图，得校正曲线（A在0.2－0.7） 3.对照法 （一）三种情况 1．两组分吸收光谱不重叠（互不干扰） 分别按单组分定量 四、多组分的定量方法（两组分） 2．两组分吸收光谱部分重叠 λ1→测A1→b组分不干扰,按单组分定量测Ca; λ2→测A2→a组分干扰→不能按单组分定量测Cb 求Ca: ？ 求Cb: 3.两组分吸收光谱互相干扰 1)解线性方程组法 步骤：i.配制对照品溶