内容正文:
动物细胞工程和胚胎工程
动物细胞工程
动物细胞培养(基础)
动物细胞融合
动物细胞核移植
动物细胞工程
1.动物细胞培养
回顾内环境稳态的相关知识,回顾机体给体内的细胞提供了哪些适宜的条件使其能够维持正常的生命活动?
动物细胞培养的条件
营养条件
其他条件
糖类、氨基酸、无机盐、维生素等
血清
1.动物细胞培养
思考
动物培养中用到的糖类是什么?
血清
血清如何灭菌?
动物细胞培养的条件
营养条件
其他条件
无菌、无毒的环境
适宜的温度、pH和渗透压
适宜的气体环境
糖类、氨基酸、无机盐、维生素等
血清
1.动物细胞培养
36.5±0.5℃
7.2-7.4
95%氧气和5%CO2
二氧化碳培养箱
思考
细胞培养中5%CO2的作用?
医院中病人吸入的氧气中为什么要含有5%CO2
细胞培养瓶
瓶盖是否要拧紧?
针对训练
黄皮,31页,2T
黄皮,32页,6T
黄皮,33页,1T
思考题
为什么要选择动物的胚胎或者幼龄的动物?
培养前,为什么要将组织分散成单个细胞?
怎么将组织分散成单个细胞?
用胰蛋白酶分散细胞,可以说明什么问题?
为什么胰蛋白酶处理细胞时间不宜过长?
可以改用胃蛋白酶处理吗?为什么?
细胞培养一段时间后分裂受阻,原因是什么?怎样解决这一问题?
思考
两类细胞的生长特点
①悬浮生长类________________________________
②贴壁生长类
___________________________________
会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻
除受密度、有害代谢物、营养物质影响外,还会发生接触抑制
接触抑制
取动物组织
制成细胞悬液
转入培养液原代培养
分瓶
传代培养
动物胚胎、幼龄动物
机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理将组织分散成单个细胞
用培养液将细胞制成细胞悬液
一类细胞能够悬浮在培养液中生长增殖
另一类需要贴附于某些基质表面才能生长增殖
悬浮培养的细胞直接用离心法收集
贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理,使之分散成单个细胞,然后再用离心法收集
思考
原代培养与传代培养的定义?
胰蛋白酶在原代培养和传代培养的作用?
针对训练
黄皮,31页,3T
黄皮,32页,5T
黄皮,33页,2T
思考
正常的人的体细胞能够无限传代培养吗?癌症细胞呢?
癌症细胞有接触抑制吗?
知识总结
植物组织培养 动物细胞培养
原理
培养前处理
取材
培养基的物理性质
培养基的成分
特有成分
植物细胞的全能性
细胞增殖
离体
用机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶将组织细胞分散开
离体植物器官、组织、细胞
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官
固体
液体(又称培养液)
有机营养成分
无机营养成分
植物激素
糖类、氨基酸、无机盐、维生素等营养物质及一些天然成分如血清
植物激素
血清
植物组织培养 动物细胞培养
特殊环境条件
结果
是否体现细胞的全能性
过程
相同点
再分化需光
气体环境
一般获得新的植株
获得大量细胞
是
否
1.培养过程中细胞都进行有丝分裂,不涉及减数分裂;
2.均需无菌操作,需要适宜的温度、pH等条件
下图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是( )
A.步骤①的操作不需要在无菌环境中进行
B.步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离
C.步骤③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理
D.步骤④培养过程中不会发生细胞转化
【答案】C
2.干细胞
iPS
取成纤维细胞
转入相关因子
细胞转化为iPS细胞
诱导iPS细胞定向分化为多种组织细胞
移植回病人体内
课后练习
课本,P47,概念检测-1和2
植物体细胞杂交
植物细胞融合
植物组织培养
温故而知新:
3.动物细胞的融合和单克隆抗体的制备
动物细胞融合技术全过程
动物细胞融合
动物细胞培养
植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合
原理
融合前处理
诱导融合的方法
意义和用途
克服远源杂交的障碍,
获得杂种植株
细胞膜的流动性
细胞膜的流动性
植物细胞的全能性
去除细胞壁后诱导原生质体融合
使细胞分散后诱导细胞融合
物理(离心、振荡、电激)化学( PEG )
物理、化学方法( PEG )
灭活的病毒
制备单克隆抗体
思考
多克隆抗体
由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体.
单克隆抗体
1.什么细胞能产生抗体?
2.一种浆细胞产生几种抗体?
3.浆细胞能否无限增殖以满足庞大的医疗需求?
4.什么细胞具有无限增殖的能力?
5.能否培养出一种能分泌抗体且增殖能力强的细胞?
用抗原注射小鼠
从患骨髓瘤的小鼠体内取骨髓瘤细胞的培养
已