实验三 从槐米中提取芦丁（课件）- 《有机化学实验》同步教学（华中科技大学版）

实验三 从槐米中提取芦丁 1 （一）实验目的 从槐米中提取芦丁 1．通过实验进一步学习碱溶酸沉法提取黄酮苷类的原理及方法。 2．巩固酸水解、结晶、化学鉴别实验和纸层析等手段在黄酮类成分分离纯化及结构鉴定中的作用。 （二）实验原理 从槐米中提取芦丁 芦丁为黄酮醇类化合物，广泛存在于植物界，尤以槐米花、荞麦中含量最高，其可作为大量提取芦丁的原料。槐米花所含芦丁含量高达12%~16%，有调节毛细血管渗透性的作用，临床用作毛细血管止血药，也作为高血压的辅助治疗药物。 芦丁是由槲皮素3位上的羟基与芸香糖（rutinose）脱水而成的苷，芸香糖为α-L-吡喃鼠李糖基（1→6）β-D-吡喃葡萄糖基组成。 （二）实验原理 从槐米中提取芦丁 由于芦丁分子结构中含有酚羟基，显弱酸性，能与碱反应生成盐而溶于水溶液，当在溶液中加入酸后，芦丁又会游离析出，所以可以利用碱溶酸沉法进行提取。利用芦丁在冷热水中溶解度差异的特性进行精制。 （三）实验仪器、试剂规格及物理常数表 从槐米中提取芦丁 1. 实验仪器 烧杯、量筒、布氏漏斗、抽滤瓶、抽滤垫、电热套、电子秤、试管、滤纸、紫外灯 2. 试剂规格 槐米花、硼砂、石灰乳、浓盐酸、乙醇、10%α-萘酚、浓硫酸、镁粉、1%AlCl3、正丁醇、乙酸 （三）实验仪器、试剂规格及物理常数表 从槐米中提取芦丁 3. 物理常数表 药品名称 性状 熔点 (℃) 溶解度 易溶 微溶 难溶 芦丁 淡绿色结晶 214~215  吡啶、碱水液 乙醇、丙酮、乙酸乙酯 乙醚、氯仿等有机溶剂 （四）实验步骤及装置图 从槐米中提取芦丁 1. 芦丁的提取 在500mL烧杯中，加入250mL水和1g硼砂 ，加热至沸腾后，加入槐米花粉末20g，在搅拌下加入石灰乳，调节pH至8.5~9，保持煮沸30分钟，趁热抽滤，弃去滤渣。滤液冷却至60~70℃，用浓HCl调至pH4~5，静置1小时，析出沉淀，抽滤，弃去滤液，收集芦丁粗品。将芦丁粗品悬浮于蒸馏水中，加热煮沸15分钟，趁热过滤，弃去不溶物，静置冷却至结晶完全，抽滤，收集芦丁结晶。于60~70℃干燥，得芦丁精制品，称重，计算产率。 （四）实验步骤及装置图 从槐米中提取芦丁 2.芦丁的定性鉴定 取芦丁3~4mg，加乙醇5~6mL使其溶解，分成三份做下述实验： （1）Molish反应 取上述溶液1~2mL，加入等体积10%α-萘酚乙醇溶液，摇匀，沿试管壁滴加浓硫酸，静置，观察交界面处颜色变化。 （2）盐酸-镁粉实验 取上述溶液1~2mL，加2滴浓盐酸，再加少许镁粉，注意观察颜色变化。 （3）AlCl3反应 取供试液滴于滤纸上，晾干，喷洒1%AlCl3醇溶液，自然光、UV光下观察颜色变化。 （四）实验步骤及装置图 从槐米中提取芦丁 3.芦丁的纸层析鉴定 层析材料：层析滤纸 展开剂：正丁醇：醋酸：水（4:1:5上层） 展开方式：预饱和后，上行展开。 显色：（1）自然光、UV光下观察。 （2）喷洒1%AlCl3醇溶液后自然光、 UV光下观察。 （五）粗产物纯化原理及注意事项 从槐米中提取芦丁 1. 碱溶酸沉的原理 具有酚羟基的游离黄酮类化合物显酸性，加入碱液后成盐溶解在水中，加入酸酸化后，转变为游离黄酮化合物在水中溶解度降低，而从水中析出。 （五）粗产物纯化原理及注意事项 从槐米中提取芦丁 2. 注意事项 （1）碱度不宜过高，一般在pH 8~9，以免加热破坏黄酮母核。 （2）酸化时酸性也不宜过强（一般在pH 4~5），以免生成 盐，致使 析出的黄酮类化合物又重新溶解，降低产品收率；或苷类发生 酸解；或溶出杂质较多，影响产品质量。 （3）加热时间不宜过强、加热强度不宜过大。 （4）当分子中有邻二酚羟基时，须加硼酸保护。 （六）讨论 从槐米中提取芦丁 （七）思考题 1．在芦丁提取过程中，将槐米放入沸水中的目是什么？能否用冷水 慢慢加热煮提？为什么？ 2．芦丁碱溶酸沉法的提取原理是什么？ 3．苷类结构的检识大体程序如何？ 4．解释本实验纸色谱中化合物的结构与Rf值的关系。 谢谢观看 $$