实验七 多糖的提取及分离（课件）- 《有机化学实验》同步教学（华中科技大学版）

实验七 多糖的提取及分离 1 （一）实验目的 多糖的提取及分离 1．通过实验学习提取多糖的原理和方法。 2．巩固多糖物质的常规纯化方法及原理，并了解多糖的结构、分类及生物活性。 （二）实验原理 多糖的提取及分离 多糖是一类广泛存在于植物、动物及微生物等有机体中的一大类天然产物。近几十年来，由于其在临床和食品等领域的广泛应用，多糖的提取和研究称为研究热点，引起了人们的广泛关注。 多糖按其来源可分为三类：动物多糖、植物多糖和微生物多糖。其中从植物中提取的多糖显得尤为重要，主要有淀粉、纤维素、半纤维素、果聚糖、树胶、黏液质、其他葡聚糖等等。 （二）实验原理 多糖的提取及分离 枸杞，属茄科植物，主要产于宁夏、甘肃、青海、陕西等地，是我国中药宝库中的瑰宝之一。被广泛应用于临床，主治肝肾阴亏，头晕目眩，腰膝酸软等症状。枸杞子又作为“药食同源”的植物性平补保健食品，被广泛用于泡酒、泡茶、煮粥等。大量研究表明枸杞中最具有提取利用价值的是枸杞多糖，枸杞多糖为枸杞子的主要功能活性成分，天然无副作用，具有调节机体免疫功能、增强记忆力、抗氧化、抗肿瘤、降血脂、降血糖、防辐射等作用。 （三）实验仪器、试剂规格及物理常数表 多糖的提取及分离 1. 实验仪器 圆底烧瓶、球形冷凝管、分液漏斗、锥形瓶、布氏漏斗、抽滤瓶、抽滤垫、滤纸、量筒、电子秤、电热套 2. 试剂规格 枸杞、三氯甲烷、甲醇、95%乙醇、无水乙醇、丙酮、无水乙醚、双氧水、正丁醇 （三）实验仪器、试剂规格及物理常数表 多糖的提取及分离 3. 物理常数表 药品名称 性状 熔点 (℃) 溶解度 易溶 难溶 枸杞多糖 棕黄色粉末 117~120  丙酮、乙醚、乙醇等有机溶剂 水 （四）实验步骤及装置图 多糖的提取及分离 1. 枸杞多糖的提取 称取25 g 枸杞，干燥粉碎后，在三氯甲烷和甲醇溶液中回流8小时，过滤。待滤饼中的有机溶剂挥发干净后加入300 ml蒸馏水，在90℃浸取2小时，过滤，得提取液。然后按照相同的操作，分别用250 ml和200 ml蒸馏水浸取。合并滤液，将滤液浓缩于80℃水浴搅拌浓缩至50ml。在搅拌状态下，将200 ml 95%乙醇加入浓缩液中，室温静置2 h 左右，抽滤，洗涤，得粗产品枸杞多糖。 （四）实验步骤及装置图 多糖的提取及分离 2. Sevag法脱蛋白 将所得到的粗枸杞多糖，加蒸馏水使之完全溶解。往枸杞多糖水溶液中加入三氯甲烷，其体积约为枸杞多糖水溶液体积的20%。再加入体积为三氯甲烷体积的1/4的正丁醇，剧烈振摇20~30min，使其充分混匀，蛋白质发生变性生成凝胶，1000r/min离心，倾出上清液，除去中间变性蛋白和下层三氯甲烷，重复以上操作直至中间层无变性蛋白，得到脱蛋白多糖。 （五）粗产物纯化原理及注意事项 多糖的提取及分离 1. 水提醇沉法 原理：糖具多个羟基，属极性大的化合物，能溶于水和稀醇，不溶于极性小的有机溶剂，则一般用水或稀醇提取。 步骤：（1）脱脂：先用有机溶剂提取以脱去脂溶性的成分。 （2）水提：用水进行提取，可提取多糖成分。 （3）醇沉：加入乙醇降低溶液的极性，使多糖类成分从水 溶液中沉淀析出。 （五）粗产物纯化原理及注意事项 多糖的提取及分离 2. 注意事项 （1）破坏或抑制酶的活性。 （用热水提取、加入无机盐或加热回流提取）。 （2）避免酸碱，保持中性。 （六）讨论 多糖的提取及分离 （七）思考题 1．本实验中为什么可以用热的蒸馏水提取枸杞多糖？ 2．本实验中为什么加入95%乙醇后，为什么粗枸杞多糖会静置析出？ 3．本实验中可能有那些副反应？粗产物中会有哪些杂质？如何除去 这些杂质？ 4．本实验如何提高枸杞多糖的提取率。 谢谢观看 $$