内容正文:
3. 4 蛋白质工程的原理
和应用
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你见过用细菌画画吗?左图是用发出不同颜色荧光的细菌“画”的美妙图案。这些细菌能够发出荧光,是因为它们体内导入了荧光蛋白的基因。
最早被发现的荧光蛋白是绿色荧光蛋白,科学家通过改造它,获得了黄色荧光蛋白等。这些荧光蛋白在细胞内生命活动的检测、肿瘤的示踪研究等领域有着重要应用。那么,科学家是怎样对蛋白质分子进行设计和改造的呢?
问题探讨 P93
蛋白质工程
逆转录
转录
DNA
RNA
翻译
肽链
复制
复制
折叠等
具有特定空间结构的蛋白质
表达生物特有的功能或性状
导入:蛋白质—生命活动的主要承担者
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翻译
DNA分子
蛋白质
转 录
翻 译
mRNA分子
转录
导入:蛋白质—生命活动的主要承担者
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以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础 ,通过 改造或合成基因,来改造现有蛋白质,或制造一种新的蛋白质,以满足人类生产和生活的需求。
---第二代基因工程
途径
目的
蛋白质工程
导入:蛋白质—生命活动的主要承担者 P93
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蛋白质工程崛起的缘由
基因工程的局限性:
天然蛋白质
符合特定物种生存需要
不一定符合人类生产、生活需要
蛋白质工程改造
一、蛋白质工程崛起的缘由 P93
原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。
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干扰素
改造
干扰素(半胱氨酸)
体外很难保存
干扰素(丝氨酸)
体外可以保存半年
赖氨酸
(人体必需氨基酸)
玉米中含量较低
蛋白质工程改造
一、蛋白质工程崛起的缘由 P93-95
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天冬氨酸激酶
二氢吡啶二羧酸合成酶
前体物质
赖氨酸
玉米活性很低,造成赖氨酸含量较低
天冬氨酸激酶
(352位的苏氨酸)
二氢吡啶二羧酸
合成酶
(104位的天冬酰胺)
天冬氨酸激酶
(异亮氨酸)
二氢吡啶二羧酸合成酶
(异亮氨酸)
改造
改造
提高产量
一、蛋白质工程崛起的缘由 P93-94
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1.目的:
二、蛋白质工程的基本原理 P94
2.天然蛋白质合成过程:
思考:为什么蛋白质工程改造基因而不是直接改造蛋白质?
①蛋白质的高级结构十分复杂,直接改造难度大;
②蛋白质是由基因编码的,改造了基因可以间接改造蛋白质;
③基因可以遗传,蛋白质无法遗传;
根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行设计改造。
按照中心法则
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实质:
3.蛋白质工程基本思路:
预期功能
生物功能
设计
蛋白质
(三维结构)
推测
改造或合成
转录
翻译
折叠
行使
目的基因
mRNA
多肽链
二、蛋白质工程的基本原理 P94
从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。
通过改造或合成基因,定向改造或生产人类所需的蛋白质。
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想一想:蛋白质工程操作程序的基本思路与基因工程有什么不同?
▲基因工程是遵循中心法则,DNA→mRNA→蛋白质→折叠产生功能,基本上是生产出自然界已有的蛋白质。
▲蛋白质工程是按照以下思路进行的:确定蛋白质的功能→蛋白质应有的高级结构→蛋白质应具备的折叠状态→应有的氨基酸序列→应有的碱基排列,创造出自然界不存在的蛋白质
二、蛋白质工程的基本原理 P94
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4.蛋白质工程基本思路的应用
某多肽链的一段氨基酸序列是:
丙氨酸
苯丙氨酸
色氨酸
谷氨酸
赖氨酸
(1)怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列?把相应的碱基序列写出来。
查密码子表得知:丙氨酸(GCU、GCC、GCA、GCG)、色氨酸(UGG)、赖氨酸(AAA、AAG)、谷氨酸(GAA、GAG)、苯丙氨酸(UUU、UUC)。
mRNA序列为:GCU(或C或A或G)UGG AAA(或G)GAA(或G)UUU(或C)
DNA序列为:CGA(或G或T或C)ACC TTT(或C)CTT(或C)AAA(或G)
GCT(或C或A或G)TGG AAA(或G)GAA(或G)TTT(或C)
二、蛋白质工程的基本原理 P94
第一个碱基 第二个碱基 第三个碱基
U C A