内容正文:
1.2.2微生物的培养技术及应用
二、微生物的选择培养和计数
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一、选择培养基 P16
培养物
纯培养物
纯培养
将接种于培养基内,在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体
由单一个体繁殖所获得的微生物群体
过程
配制培养基→灭菌→接种→分离→培养
菌落
如何从自然界中分离出需要的特定微生物?
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一、选择培养基 P16
美国黄石国家公园
水生栖热菌(Thermus aquaticus)
耐高温DNA聚合酶
提取
用于
聚合酶链式反应
体外DNA扩增
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一、选择培养基 P16
筛选原理:
水生栖热菌能在70~80℃高温条件下生存,而其他多数微生物不能生存
70℃ 大肠杆菌
70℃ 栖热菌
80℃ 栖热菌
100℃ 栖热菌
人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。
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一、选择培养基 P16
选择培养基配方的设计
思考·讨论
★选择培养基
在微生物学中,将 的微生物生长,同时 的微生物生长的培养基,称为 。
尿素[CO(NH2)2]含氮量高,化学性质相对稳定,是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后,会被土壤中的某些细菌分解成NH3,NH3再转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素为,是因为它们能合成脲酶,脲酶催化尿素分解产生NH3,NH3可以为细菌生长的氮源。
CO(NH2)2 + H2O
CO2 + 2NH3
脲酶
转化
NH4+
NO3-
允许特定种类
抑制或阻止其他种类
选择培养基
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一、选择培养基 P16
选择培养基配方的设计
思考·讨论
尿素[CO(NH2)2]含氮量高,化学性质相对稳定,是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后,会被土壤中的某些细菌分解成NH3,NH3再转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素为,是因为它们能合成脲酶,脲酶催化尿素分解产生NH3,NH3可以为细菌生长的氮源。
讨论1.如果让你配制一种培养基,将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来,培养基的配方该如何设计?
设计一种选择培养基,以尿素作为唯一氮源,只允许以尿素作为氮源的微生物生长。
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讨论2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点?
一、选择培养基 P16
牛肉膏 5.0g
蛋白胨 10.0g
NaCl 5.0g
琼脂 20.0g
蒸馏水 定容到1000ml
KH2PO4 1.4g
NaH2PO4 2.1g
MgSO4·7H2O 0.2g
葡萄糖 10.0g
尿素CO(NH2)2 1.0g
琼脂 15.0g
蒸馏水 定容到1000ml
配方一:培养细菌
配方二:培养可以分解尿素的细菌
(1)从物理性质看此培养基属于哪类?从用途上属于哪类培养基?
固体培养基。
配方二是以尿素作唯一氮源的选择培养基
(2)此培养基中共有哪些成分?在此培养基中哪些作为碳源、氮源?
共有成分:
碳源、氮源、无机盐、水
培养基一的碳源为_______,氮源为_______;
培养基二的碳源为_______,氮源为_______;
牛肉膏
蛋白胨
葡萄糖
尿素
一、选择培养基 P16
★选择培养基
在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类的微生物生长的培养基,称为选择培养基。
温度
提供70~80℃的培养温度
筛选出水生栖热菌
营养
筛选出石油分解菌
只提供石油为唯一碳源
营养
筛选出纤维素分解菌
只提供纤维素为唯一碳源
pH
选出耐高pH的细菌
提供高pH的生存环境
氧气
筛选出厌氧细菌
不提供氧气的生存环境
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一、选择培养基 P16
★选择培养基
大肠杆菌
金黄色葡萄球菌
大肠杆菌
金黄色葡萄球菌
葡萄糖做碳源
苯乙醇