第八章 紫外 - 可见分光光度法（课件）- 《分析化学》同步教学（人卫版第9版）

吸光系数 分析化学 分析化学 吸光系数 2 吸光系数 朗伯-比尔定律中额比例常数K称为吸光系数，有如下表示方法： 2 1．摩尔吸光系数 一定λ下，c=1mol／L， L=1cm 的吸光度，用ε表示，其量纲为L／（mol·cm）。 2、光吸收系数 一定λ下,c=1g／L ，L=1cm时的吸光度常用α表示，其量纲为L／（g·cm）。 分析化学 吸光系数 3 3、比吸光系数（百分吸光系数 ） 一定λ下,c=1%(W/V)，L=1cm时的吸光度。 换算公式 ε= α×M ε= 10α 分析化学 吸光系数 透光率和吸光度 分析化学 分析化学 透光率和吸光度 5 5 透光率和吸光度 透光率指透射光的强度It与入射光强度I0之比。 透光率定义： T 取值为0.0 % ~ 100.0 % 全部吸收 T = 0.0 % 全部透射 T = 100.0 % 分析化学 透光率和吸光度 6 6 透光率的倒数反映了溶液对光的吸收程度，常用吸光度来表示，其定义为： A = lg 1 T A= lg I0 It A=–lgT T与A关系： T=0，A=∞ ，T=100%，A=0 分析化学 透光率和吸光度 紫外-可见分光光度计主要部件 目前，紫外可见分光光度计已成为全世界历史最优久、使用最多、覆盖面最广的常规分析仪器。 7 紫外-可见分光光度计主要部件 测定范围： 几乎所有的无机元素和在紫外及可见光区有特征吸收的有机物或有机化合物都能用紫外-可见分光光度法进行测定。 8 紫外-可见分光光度计主要部件 紫外-可见分光光度计由5个部件组成： ①辐射源。必须具有稳定的、有足够输出功率的、能提供仪器使用波段的连续光谱，如钨灯、卤钨灯（波长范围350～2500纳米），氘灯或氢灯（180～460纳米），或可调谐染料激光光源等。 9 紫外-可见分光光度计主要部件 ②单色器。由入射、出射狭缝、透镜系统和色散元件组成，用以产生高纯度单色光束，其功能包括将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束。 ③试样容器，又称吸收池。供盛放试液进行吸光度测量之用，分为石英池和玻璃池两种，前者适用于紫外到可见区，后者只适用于可见区。 10 紫外-可见分光光度计主要部件 ④检测器。常用的有光电管或光电倍增管，后者较前者更灵敏，适用于检测较弱的辐射。近年来还使用光导摄像管或光电二极管矩阵作检测器，具有快速扫描的特点。 ⑤显示装置。常备有微处理机、荧光屏显示和记录仪，可将图谱、数据和操作条件都显示出来。 11 沧州医学高等专科学校 和亚楠 紫外—可见光分光光度计的类型 分析化学 分析化学 紫外-可见分光光度计类型 13 紫外—可见光分光光度计的类型 （一）可见光分光光度计 在实际工作中，常用国产722型可见分光光 度计。 722型分光光度计外形如图所示 分析化学 紫外-可见分光光度计类型 14 续前页 分析化学 紫外-可见分光光度计类型 15 续前页 （二）紫外—可见光分光光度计的类型 1.单波长分光光度计又可分为单光束分光光度计和双光束分光光度计两类。 （1）单波长单光束分光光度计，是用钨灯和氢灯作光源，从光源到检测器只有一束单色光。 分析化学 紫外-可见分光光度计类型 16 （续前页）单波长单光束分光光度计外观示例 分析化学 紫外-可见分光光度计类型 17 续前 （2）单波长双光束光路是已被普遍采用的光路，这类仪器不管是什么型号都是从单色器发出一束单色光，用一个旋转的扇面镜（又称斩光器）将它分成波长相同的两束单色光，交替通过参比池溶液和样品池溶液后，再用一同步旋转的扇面境将两束透过光交替地照射到光电倍增管，使光电倍增管产生一个交变的脉冲信号，经过比较放大后，由显示器显示出透光率、吸光度、浓度等。 分析化学 紫外-可见分光光度计类型 18 （续前页）单波长双光束分光光度计光路原理图 分析化学 紫外-可见分光光度计类型 19 续前2.双波长分光光度计 这类分光光度计的特点是仪器采用两个并列的单色光器，分别产生波长不同，交替照射同一试样溶液，得到同一试样溶液对不同波长单色光的吸光度差值。这类分光光度计的优点之一是测定时不需要参比池，可以避免吸收池不匹配、参比溶液与试样溶液的折光率和散射作用不同而产生的误差，特别适用于有背景吸收或有干扰情况下的测定；其优点之二，是可以以双波长的方式工作，也可以用单波长双光束的方式工作。 分析化学 紫外-可见分光光度计类型 20 （续前页）双波长双光束分光光度计光路原理 分析化学 紫外-可见分光光度计类型 标准曲线 沧州医学高等专科学校 刘超 分析化