1.2.2微生物的选择培养与计数课件2023-2024学年高二下学期生物人教版选择性必修3

第一章 第2节 微生物的培养技术及应用 第2课时:微生物的选择培养和计数 自然界中微生物数量繁多,种类庞杂,要想从中分离出需要的特定微生 物并不容易,尤其当要分离的微生物在混合的菌群中不是优势种群时,仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。该怎么办呢? 1 选择培养基 2 微生物的选择培养 目 录 二、微生物的的选择培养和计算 3 微生物的数量测定 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 4 选择培养基 一 寻找耐高温的DNA聚合酶 科学实例 PCR是一种在体外DNA复制的技术,此项技术要求使用耐高温(930C)的DNA聚合酶。 寻找耐高温的DNA聚合酶 科学实例 耐高温的酶 耐高温生物体 高温环境(热泉、火山口) 寻找 寻找 1966年,布鲁克在美国黄石国家公园的一个热泉中发现了耐热的Taq细菌,并分离到耐高温的DNA聚合酶(Taq酶) 美国黄石国家公园 寻找耐高温的DNA聚合酶 科学实例 筛选水生栖热菌的条件是什么?为什么该条件能让其“ 脱颖而出”? 你还知道哪些条件能影响微生物的生存? 因为热泉温度为70~80 ,淘汰了绝大多数微生物,只有水生栖热菌被筛选出来。 pH和氧气浓度等; 常用的消毒和灭菌方法——消毒 资料卡 在实验室中选择培养特定的微生物有什么启示? 人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。 耐寒微生物 耐热微生物 石油分解菌 选择培养基配方的设计 思考•讨论 尿素[CO(NH2)2]含氮量高,化学性质稳定,是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素被土壤中某些细菌分解成NH3,再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。 这些细菌之所以能分解尿素,是因为能合成脲酶,来催化尿素分解。 CO(NH2)2+H2O CO2+2NH3 脲酶 尿素分子模型 选择培养基配方的设计 思考•讨论 1.你如何设计培养基配方,将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来? 2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点? 培养基添加尿素作唯一氮源,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素、缺乏氮源而不能生长发育繁殖。 见P18页培养基配方 该培养基与普通培养基相比较,共同点是都以有机碳(如葡萄糖)作为碳源,都有水和无机盐;不同点是该培养基以尿素作为唯一氮源,使只有能以尿素作为氮源的微生物生长。 过渡 通过以上事实分析,请你总结选择培养基的概念! 允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基 一、选择培养基 不加氮源 自养微生物 酵母菌和霉菌(青霉素能杀死细菌、放线菌) 固氮微生物 加入青霉素 加高浓度食盐 金黄色葡萄球菌 石油是唯一碳源 能消除石油污染的微生物 不加碳源 过渡 如果想知道1g土壤中有多少能分解尿素的细菌,仅有选择培养基能实现吗? 微生物的选择培养 二 通常1g土壤中有几亿到几百亿个土壤微生物,其中,细菌的数量最多,能分解尿素的细菌是其中的一部分。 如何把能分解尿素的细菌从众多细菌中挑选出来?可否直接制备土壤溶液,接种到选择培养基上进行培养? 不能。因为土壤中的微生物非常多,必须要经过稀释才能接种到培养基上。 二、微生物的选择培养 【自主探究】请结合教材17-18页,思考以下问题: 1.简述稀释凃布平板法的操作步骤? 2.与平板划线法相比,为什么稀释涂布平板法可用于细菌计数? 任务一 二、微生物的选择培养 1 10 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 102 1 103 1 104 1 105 1 106 1 107 10g 资料:土壤溶液的梯度稀释及涂布平板操作的视频。 你能简述稀释凃布平板法的操作步骤吗? 1.稀释凃布平板法 (1)样品的稀释(梯度稀释菌液) ②将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀。取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中,依次等比稀释。 1 10 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 102 1 103 1 104 1 105 1 106 1 107 9 mL 无菌水 90mL无菌水 10g ①铲取土壤,将样品装入纸袋中 1.稀释凃布平板法 在火焰旁将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀,制成菌液。 ③取0.1mL菌液,滴加到培养基表面。 ④将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。 ⑤将涂布器放在火焰上灼烧,待酒精燃尽、涂布器冷却后,再进行涂布。 ⑥用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿,使涂布均匀。 微量移液器 1.稀释凃布平板法 (2)稀释涂布平板法操作 待涂布的菌液被培养基吸收 将平板倒置 30~37 恒温培养1~2d后进行计数 1.稀释凃布平板法 (2)稀释涂布平板法操作 平板划线法最开始的划线很可能菌