内容正文:
实验九 绿叶中色素的提取和分离
知识总结
材料用具
新鲜的绿叶(如菠菜的绿叶)。干燥的定性滤纸,试管,棉塞,试管架,研钵,玻璃漏斗,尼龙布,毛细吸管,剪刀,药匙,量筒(10mL),天平等。无水乙醇(也可用体积分数为95%的乙醇加入适量无水碳酸钠来代替),层析液(由20份在60~90℃下分馏出来的石油醚2份丙酮和1份苯混合而成),二氧化硅和碳酸钙。
方法步骤
(1)提取绿叶中的色素
①称取5g绿叶,剪去主叶脉,剪碎,放人研钵中。
②向研钵中放入少许二氧化硅和碳酸钙,再加入5~10mL无水乙醇,迅速、充分地进行研磨(二氧化硅有助于研磨得充分,碳酸钙可防止研磨中色素被破坏)。
③将研磨液迅速倒人玻漏斗(漏斗基部放一块单层尼龙布)进行过滤。将滤液收集到试管中,及时用棉塞将试管口塞严。
(2)制备滤纸条
将干燥的定性滤纸剪成宽度略小于试管直径、长度略小于试管长度的滤纸条,再将滤纸条一端剪去两角,并在距这一端底部1cm处用铅笔画一条细的横线。
(3)画滤液细线
用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线均匀地画出一条细线(也可将滤液倒入培养皿,再用盖玻片蘸取滤液,在横线处按压出均匀的细线)。待滤液干后,再重画一到两次。
(4)分离绿叶中的色素
将适量的层析液倒人试管中,将滤纸条(有滤液细线的一端朝下)轻轻插入层析液中,随后用棉塞塞紧试管口。
注意:不能让滤液细线触及层析液,否则滤液细线中的色素会被层析液溶解,而不能在滤纸上扩散。也可用小烧杯代替试管,用培养皿盖住小烧杯。
(5)观察与记录
观察试管内滤纸条上出现了几条色素带,以及每条色素带的颜色和宽窄。将观察结果记录下来。
注意事项
(1)选新鲜、深绿色叶片,含色素较多。
(2)加入SiO2和CaCO3一定要少,否则滤液浑浊,杂质多,颜色浅,实验效果差。加无水乙醇不能过多,否则色素提取液过稀,分离结果不明显。研磨要迅速充分。
(3)滤液细线不仅要求细、直,而且要求含有较多的色素,所以待滤液干后再画几次。
(4)滤液细线不能触及层析液,滤纸条也不能触及试管壁。
(5)本实验使用的试剂有毒,因此实验前后要洗手。
(6)为减少吸入层析液中有毒性的挥发性物质,分离色素这一步应在通风好的条件下进行。实验结束应尽快用肥皂将手洗干净。
习题训练
1.下列关于“绿叶中色素的提取和分离”实验的叙述,错误的是( )
A.提取绿叶中色素时可用无水乙醇作为溶剂
B.研磨时加入CaCO3可以防止色素被破坏
C.研磨时添加石英砂有助于充分研磨
D.色素分离实验中,滤纸条上不同色素带的位置可以表示色素的含量
2.某同学用两种树叶进行了光合色素的提取和分离实验,分别得到如图所示的滤纸条①和②。下列叙述正确的是( )
A.分离色素利用了光合色素易溶于有机溶剂无水乙醇的原理
B.应在研磨叶片后添加适量CaCO3防止叶绿素被破坏
C.滤纸条①比滤纸条②的色素对红光吸收较多
D.滤纸条②的色素可能提取自生长的柳树幼叶
3.实验材料的选择在科学研究中起着至关重要的作用。下列实验中材料选择错误的是( )
序号
实验名称
实验材料
A
检测生物组织中的还原糖
梨
B
绿叶中色素的提取和分离
菠菜叶
C
探究温度对酶活性影响
过氧化氢、过氧化氢酶
D
观察植物细胞的质壁分离
洋葱鳞片叶内表皮
A.A B.B C.C D.D
4.下列关于“绿叶中色素的提取与分离”实验的叙述,正确的是( )
A.在滤纸条上沿铅笔线连续画滤液细线2~3次
B.在研磨叶片后立即加入CaCO3可防止叶绿素被破坏
C.分离色素时要注意滤液细线不能低于层析液液面
D.滤纸条上色素带的宽窄反映了色素在层析液中的溶解度
5.下面有关生物实验原理、方法或结果的描述中正确的是( )
A.用来鉴定还原糖的斐林试剂不能用来鉴定蛋白质
B.用层析液来提取和分离色素
C.番茄含有丰富的葡萄糖和果糖,常用作还原糖鉴定的材料
D.显微镜下观察到的质壁分离是指细胞质与细胞壁的分开
6.以洋葱为实验材料,下列叙述错误的是( )
A.可用无水乙醇提取洋葱管状叶中的光合色素,经纸层析法分离后得到四条色素带
B.可用一定浓度的尿素溶液处理洋葱鳞茎叶细胞,观察质壁分离和自动复原现象
C.可用甲紫溶液使洋葱根尖细胞中的染色体着色,找到分生区细胞观察有丝分裂动态过程
D.可用光学显微镜观察紫色洋葱鳞茎叶外表皮细胞,以观察植物细胞的细胞壁和大液泡
7.下列说法正确的是( )
A.在脂肪的鉴定实验中,体积分数为50%的酒精作用是溶解组织中的油脂
B.用酸性重铬酸钾溶液检测酵母菌培养液呈灰绿色,则说明酵母菌无氧呼吸产生酒精
C.叶绿素在层析液中溶解度比类胡萝卜素低,随层析液在滤纸上扩散的慢
D.分泌蛋白的合成和运输以及人鼠细胞融合实验都用到了同位素标