实验02 酵母菌的纯培养-【同步实验课】2023-2024学年高二生物教材实验大盘点（人教版2019选择性必修3）

实验02 酵母菌的纯培养 1、 配制培养基： 1、 称去皮马铃薯200g、切块 2、 加水1000ml，加热煮沸 3、 纱布过滤 4、 加20g葡萄糖 5、 加20g琼脂 6、 用蒸馏水定容至1000ml 2、 灭菌 1、 灭菌培养基：高压蒸汽灭菌法 2、 培养皿灭菌：干热灭菌法 3、 倒平板 1、 条件：50℃左右（酒精灯旁） 2、 操作步骤 4、 接种和分离：平板划线法 5、 培养酵母菌 1、 方法：将接种后的平板和一个未接种的平板倒置放到恒温箱中培养。 2、 条件：28℃左右。 一、平板划线法注意问题： 1、在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环的原因：划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免污染环境和感染操作者。 2、在第二次以及其后的划线操作时，从上一次划线的末端开始划线的原因：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 3、接种结束后，要将一个未接种的培养基一起培养原因：培养未接种的培养基的作用是对照，未接种的培养基经过培养后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的； 4、未接种的培养基表面如果有菌落生长，说明：培养基灭菌不彻底，或培养基被污染了，需要重新制备。 二、无菌技术的三个主要注意点 ①实验前应对操作空间、操作人员进行消毒，对所用器具和培养基进行灭菌。 ②实验进行时需在酒精灯火焰周围无菌区操作。 ③避免已杀菌处理的材料再次污染。 三、倒平板时的注意事项 ①琼脂是一种多糖，在98 ℃以上熔化，在44 ℃以下凝固。倒平板时高于50 ℃则会烫手，低于50 ℃时若不及时操作，琼脂会凝固。 ②可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 1．（2023·江苏·统考高考真题）下列关于细菌和酵母菌实验的叙述正确的是（　　） A．通常酵母菌培养基比细菌培养基有更高的碳氮比 B．通常细菌的生长速度比酵母菌快，菌落比酵母菌落大 C．通常细菌培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌，酵母菌培养基用过滤除菌法除菌 D．血细胞计数板既可用于酵母菌的数量测定，也可用于细菌的数量测定 2．（2023·辽宁·统考高考真题）细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的。利用空气微生物采样器对某市人员密集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度（菌落数/m³）。下列叙述错误的是（    ） A．采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理 B．细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置 C．同一稀释度下至少对3个平板计数并取平均值 D．稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高 3．（2023·山东·高考真题）平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是（    ） A．不含氮源的平板不能用于微生物培养 B．平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒 C．接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃 D．利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物 4．（2023·广东·统考高考真题）研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌。根据堆肥温度变化曲线（如图）和选择培养基筛选原理来判断，下列最可能筛选到目标菌的条件组合是（    ） A．a点时取样、尿素氮源培养基 B．b点时取样、角蛋白氮源培养基 C．b点时取样、蛋白胨氮源培养基 D．c点时取样、角蛋白氮源培养基 5．（2022·辽宁·统考高考真题）为避免航天器在执行载人航天任务时出现微生物污染风险，需要对航天器及洁净的组装车间进行环境微生物检测。下列叙述错误的是（    ） A．航天器上存在适应营养物质匮乏等环境的极端微生物 B．细菌形成菌膜粘附于航天器设备表面产生生物腐蚀 C．在组装车间地面和设备表面采集环境微生物样品 D．采用平板划线法等分离培养微生物，观察菌落特征 6．（2022·江苏·统考高考真题）下列是某同学分离高产脲酶菌的实验设计，不合理的是（    ） A．选择农田或公园土壤作为样品分离目的菌株 B．在选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源 C．适当稀释样品是为了在平板上形成单菌落 D．可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲酶菌 7．（2021·北京·统考高考真题）人体皮肤表面存在着多种微生物，某同学拟从中分离出葡萄球菌。下述操作不正确的是（　　） A．对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌 B．使用无菌棉拭子从皮肤表面取样 C．用取样后的棉拭子在固体培养基上涂布 D．观察菌落的形态和颜色等进行初步判断 8．（2021·山东·统考高考真题）解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲，乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。甲菌菌落周围呈现深蓝色，乙