内容正文:
实验一 检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质
知识总结
1.实验原理
①糖类中的还原糖(如葡萄糖、果糖)中的醛基在加热条件下能将Cu(OH)2中的Cu2+还原成Cu+,从而生成砖红色的Cu2O沉淀。
②脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色。
③蛋白质(含有与双缩脲相似的肽键)与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。
2.实验流程
待测化合物
测试试剂
实验步骤与结果
淀粉
碘液
向组织样液内加入碘液,溶液呈现蓝色
还原糖
婓林试剂(甲液:0.1g/ml NaOH;乙液:0.05g/ml CuSO4)
2 备组织样液;
②鉴定样液:样液+新鲜配制的婓林试剂,50~65℃水浴2min(可酒精灯直接加热);
③砖红色沉淀。
脂肪
苏丹Ⅲ染液
①切片;②染色;③去浮色(50%酒精);④显微镜观察
⑤变橘黄色
蛋白质
双缩脲试剂(A液:0.1g/ml NaOH;B液:0.01g/ml CuSO4)
①制备样液(豆浆或稀释蛋清或新鲜肝脏提取液)
②鉴定(先加A再加B)
③呈现紫色
3.注意事项
①选择还原糖量较高的生物组织,而且组织颜色较浅或为白色,如苹果、梨。
②选富含脂肪的种子,最好不使用水稻、玉米、小麦等淀粉含量较高的种子。
③富含蛋白质的生物组织,如大豆、蛋清,可直接用豆浆做实验,或者用稀释的蛋清。
4.拓展:在医学上用于糖尿病、肾炎等疾病的诊断;鉴定生物组织或器官中的有关成分;检测食品(如奶粉等)的成分鉴定;鉴定酶的化学本质。
习题训练
1.下列关于实验操作的叙述,正确的是( )
A.用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液,可直接用于蛋白质的鉴定
B.花生子叶经苏丹Ⅲ染液染色后,在显微镜下观察到橘黄色的脂肪颗粒
C.鉴定可溶性还原糖时,要将加入斐林试剂的甲液摇匀后,再加入乙液
D.检测鸡蛋清稀释液中的蛋白质时先加入双缩脲试剂A 液再加入B 液混合均匀后水浴加热后进行观察
2.以下高中生物学实验中,操作不正确的是( )
A.制备纯净的细胞膜,最好选用鸡的成熟红细胞做实验材料
B.鉴定蛋白质时,需先加入NaOH溶液,再加入CuSO4溶液,混匀观察颜色变化
C.用苏丹Ⅲ染液染色,观察花生子叶细胞中的脂肪滴(颗粒)
D.由低倍镜转换到高倍镜前,需将待观察目标移至视野中央
3.苏轼的诗“小饼如嚼月,中有酥和饴”中,“饴”是麦芽糖,“酥”是动物的酥油。下列相关叙述正确的是( )
A.鉴定“饴”是否为还原糖,可将其溶解后滴加斐林试剂并水浴加热
B.淀粉和麦芽糖均是制作小饼的谷物中含量丰富的多糖
C.鉴定“酥”可用双缩脲试剂,会出现橘黄色的脂肪滴
D.糖类和脂质是重要的能源物质,多食“小饼”等富含糖与脂质的食品有益健康
4.“颜色反应”是鉴定特定物质的常用方法。下列叙述正确的是( )
A.用苏丹Ⅲ检测组织切片内的脂肪时,要用50%酒精洗去浮色
B.为检测待测样液中是否含有蔗糖,可以使用斐林试剂检测
C.若待测样液中含蛋白质,则加入双缩脲试剂后样液颜色变蓝
D.斐林试剂和双缩脲试剂所含物质种类不同,使用方法也不同
5.下列关于检测生物组织中糖类、脂肪、蛋白质的实验,叙述正确的是( )
A.久置的蔗糖溶液用斐林试剂检测,出现了砖红色沉淀,说明蔗糖氧化分解了
B.制作花生子叶的临时装片时,染色后需用无水乙醇洗去浮色
C.蛋白质经高温处理后,仍然可以和双缩脲试剂发生黄色反应
D.若观察细胞中的脂肪颗粒需要使用高倍显微镜
6.下列操作和叙述正确的是( )
A.检测脂肪实验中,采用体积分数为75%的酒精洗去浮色
B.施用一定浓度的Mg2+溶液可能使桂花树泛黄的叶片变绿
C.显微镜下观察到某细胞质逆时针方向流动,实际上是顺时针方向流动
D.鉴定蛋白质和还原糖实验中,采用的氢氧化钠溶液的浓度不同,硫酸铜的浓度相同
7.近期,曲“红伞伞,白杆杆,吃完一起躺板板”将致幻毒菇毒蝇伞推向网络热搜,鹅膏蕈碱是毒蝇伞中所含有的主要致幻毒物之一,它是一种环状八肽。下列关于毒蝇伞及板(木材)中还原糖、脂肪、蛋白质(或多肽)的鉴定实验的叙述中,错误的是( )
A.在三个实验中,只有一个实验需要进行水浴加热
B.斐林试剂的乙液经稀释后,可作为双缩脲试剂的 B液使用
C.鉴定还原糖和蛋白质(或多肽)时都使用NaOH 和CuSO₄溶液,原理基本相同
D.鉴定的都是细胞中的化学成分,一般应先提取组织样液
8.下列关于“检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质”实验的叙述,错误的是( )
A.检测还原糖时,应向组织样液中先加入斐林试剂甲液、后加入乙液
B.西瓜汁含有较多的葡萄糖和果糖,但不是检测还原糖的理想材料
C.检测脂肪时,需用体积分数为50%的酒精洗去浮色
D.用鸡蛋清作为检测蛋白质的材料时应适当稀释
9.下而是几个教材实验提出