内容正文:
《细胞分泌蛋白的合成与运输过程》实验解读及实例分析
1、研究方法:同位素标记法
(1)同位素标记法:在同一元素中,质子数相同,中子数不同的原子为同位素,如18O与16O,12C与14C。同位素的物理性质可能有差异,但组成的化合物化学性质相同。用物理性质特殊的同位素来标记化学反应中原子的去向,就是同位素标记法。同位素标记可用于追踪物质的运行和变化规律。通过同位素标记的化合物,可以弄清化学反应的详细过程。
(2)同位素种类:
①放射性同位素:生物学研究中常用的同位素有的具有放射性,如14C、32P、3H、35S等;
②稳定同位素:没有放射性,如15N、18O等。
(3)应用:研究细胞内的元素或化合物的来源、组成、分布和去向等。
2、实验过程
(1)选择同位素3H标记的亮氨酸,向豚鼠胰腺腺泡细胞中注射3H标记的亮氨酸,短时间培养
(2)不同的时间、多次取样,制备组织切片,利用放射性自显影技术,追踪被标记亮氨酸的转移路径。
3、实验结果
3min
17min
117min
放射性标记的蛋白质
内质网
高尔基体
分泌颗粒(黑色银颗粒)
放射性标记的蛋白质
放射性标记的蛋白质
提示:如果把豚鼠的胰腺腺泡细胞放在含3H标记的亮氨酸的培养液中培养,持续追踪放射性出现的部位依次是:
细胞膜、核糖体、内质网、囊泡、高尔基体、囊泡、细胞膜、胞外。
例析、甲状腺细胞可以将氨基酸和碘合成甲状腺球蛋白,并且将甲状腺球蛋白分泌到细胞外,其过程如图所示。下列叙述错误的是( )
A.甲状腺球蛋白以胞吐的方式分泌到细胞外,并且消耗能量
B.细胞内的碘浓度远远高于血浆中的碘浓度,这表明a是主动运输过程
C.与c过程有关的细胞器是内质网、高尔基体、线粒体
D.向甲状腺细胞中注射3H标记的亮氨酸,则出现3H
的部位依次是④①③②⑥④
点评:蛋白质属于生物大分子,因此其运出细胞的方式属于胞吐,需要消耗能量;细胞内碘浓度高于细胞外,则碘离子是逆浓度梯度进入细胞的,属于主动运输;c表示蛋白质的加工、修饰和分泌过程,这一连续过程需要的细胞器是内质网、高尔基体以及供能的线粒体;向甲状腺细胞中注射3H标记的亮氨酸,则出现3H
的部位依次是①③②⑥④。
D
4、结果分析
细胞外
囊泡
囊泡
分泌
线粒体供能
肽链与核糖体转移到内质网
加工、分类、包装、发送
核糖体
内质网
高尔基体
细胞膜
游离的核糖体将氨基酸形成肽链
加工折叠形成一定空间结构的蛋白质
进一步修饰加工
囊泡与细胞膜融合
亮氨酸是必需氨基酸,必须从环境中获取,而不能自身合成;且亮氨酸参与了该细胞分泌蛋白的合成。
(2)与分泌蛋白合成和运输有关的细胞器:核糖体、内质网、高尔基体、线粒体。
(3)参与分泌蛋白合成运输结构:核糖体、内质网、高尔基体、线粒体及细胞膜。
5、问题分析
(1)为什么选择亮氨酸作为同位素3H的标记物?
(4)分泌蛋白从合成运输到细胞外的过程中一共穿过多少层生物膜?
0层,因为整个过程是以囊泡的形式转移。
(5)分泌蛋白合成过程中,相关生物膜膜面积的变化?
左图表示的是前后两个时间点的变化,右图表示的是一定时间段内的变化。
_________
_________
_________
前
后
时间
0
膜面积
①_________
③_________
②_________
时间
0
②
③
①
①
②
③
内质网膜
高尔基体膜
细胞膜
内质网膜
高尔基体膜
细胞膜
膜面积
(6)细胞核中是否可能会出现放射性?
可能,因为亮氨酸也可能参与了细胞核中有关蛋白质的合成。
(7)如果仅标记亮氨酸中羧基中的3H能否追踪分泌蛋白的合成与运输过程?
不能,因为羧基中的3H会脱去形成水。
(8)细胞膜上的蛋白质、溶酶体中的水解酶和细胞分泌蛋白一样,合成过程也要内质网、高尔基体的参与。
(9)分泌蛋白是在内质网上的核糖体中合成的,而不是仅在游离的核糖体中合成的,为什么?
分泌蛋白的合成和加工不能仅靠核糖体完成
例析1、下图是某动物细胞中分泌蛋白合成、运输和分泌的示意图,下列叙述错误的是( )
A.分泌蛋白在结构①上合成的过程中有水产生
B.结构②能对来自结构③的蛋白质进行加工、分类和包装
C.结构④与细胞膜融合后,分泌蛋白被分泌到细胞外
D.线粒体能为分泌蛋白的合成、运输和分泌提供能量
点评:结构③能对来自结构②的蛋白质进行加工、分类和包装,B错误。
6、实例分析
B
例析2、如图表示分泌蛋白的合成、加工和运输过程,①②③表示细胞器,a、b、c表示某些过程。下列说法中错误的是( )
A.①②③分别是内质网、高尔基体和线粒体
B.该过程可以说明细胞器的结构和功能之间具有密切的联系
C.a表示脱水缩合过程,b、c表示蛋白质的加工及运输过程
D.图解中的过程在原核细胞中也可以进行
D