内容正文:
1.1重组DNA技术的基本工具
学科
生物
年级
时间
2023年 月 日
课题
重组DNA技术的基本工具
课型
新课
课时
第1课时
主备教师
学习目标
1.概述基因工程的概念。
2.阐明DNA重组技术的实现需要利用的酶。
3.探究限制酶的种类以及选择。
【知识填空】
一、基因工程的概述
1. 阅读P70相关内容,归纳基因工程的概念和理论基础。
概念:指按照人们的愿望,通过 等技术,赋予生物 ,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。从技术操作层面看,由于基因工程是在 上进行设计和施工的,因此又叫作 技术。
二、重组DNA技术所需三种基本工具及其作用
1. 限制性内切核酸酶(限制酶)
阅读教材P71,完成以下填空:
①来源:限制酶主要是从 中分离纯化出来的。
②功能:识别双链DNA分子的 ,并且使每一条链中特定部位的 断开。
③特点:具有 ,表现在两个方面:
识别——双链DNA分子的某种特定 序列。
切割——特定核苷酸序列中的 。
④作用结果:当限制酶在它识别序列的 将DNA分子的两条链分别切开时,产生的是 ;当限制酶在它识别序列的 切开时,产生的是 。
【思考与讨论1】
1.为什么不同生物的DNA分子能拼接起来?
2.为什么一种生物的基因可以在另一种生物细胞内表达?
【知识拓展】
1.四种常见限制酶的识别序列及切割位点。
【课堂检测】
1.下列关于限制性内切核酸酶(限制酶)的叙述,正确的是 ( )
A.均来源于原核生物
B.识别序列均由6个核苷酸组成
C.特异性表现在识别和切割两个方面
D.也可识别RNA分子的特定核苷酸序列
2、如图表示限制酶切割某DNA分子的过程,从图中可知,该限制酶能识别的碱基序列及切割位点是 ( )
A.5'-CTTAAG-3',切点在C和T之间
B.5'-CTTAAG-3',切点在G和A之间
C.5'-GAATTC-3',切点在G和A之间
D.5'-CTTAAC-3',切点在C和T之间
3、 …TATCGTACGATAGGTACTTAA
…ATAGCATGCTATCCATG
AATTCGGCATAC…
GCCGTATG…
GAGCCATACTTAA
AATTCTCGGTATG
(1).从以上操作可推知,在切割含“目的片段”的DNA分子时,需用限制酶切割___次此DNA分子,断 个磷酸二酯键,产生____个末端,出现____个游离的磷酸基团。
(2).切割目的基因和载体时,需要用_______限制酶,目的是_______________
(3).目的片段翻转过来,可以连接吗?____
(4).目的片段可以自身环化吗?____
【拓展练习】
下列操作中选用哪种限制酶切割构建重组DNA分子最好?
(注:AmpR表示氨苄青霉素抗性基因,neo表示新霉素抗性基因)
【课堂小结】
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