项目5 植物脱毒技术课件高等教育出版社

农业生物技术 项目5 植物脱毒技术 项目目录 项目导入 任务5.1 植物脱毒苗的培育 任务5.2 脱毒苗的病毒检测 任务5.3 脱毒苗的繁殖和保存 项目目录 项目导入 某果农最近发现果树病害越来越严重，他尝试喷洒多种药物，但发现无任何效果，且一株发病，导致整个果园的其他植株也染病。经过咨询，他了解到果树感染了病毒病，万分着急的他找到你，希望你能够帮他解决这个问题。 任务5.1 植物脱毒苗的培育 任务目标 任务准备 任务实施 任务反思 1.了解脱毒苗的概念及意义。 2.了解脱毒的原理。 3.掌握茎尖脱毒技术。 4.了解热处理脱毒技术。 1.能使用茎尖脱毒技术对常见植物病毒病进行脱毒。 2.具备获取教材外知识的能力。 任务目标 一、植物脱毒的意义 二、植物脱毒的方法 任务准备 一、植物脱毒的意义 植物病毒病是由植物病毒侵染引起的植物病害，植物病毒感染植物后，会打乱植物细胞的正常代谢活动，使植物的生长和发育遭到破坏，从而导致植物生活力降低、抗逆性减弱、产量和品质下降。 菊花花叶病 柑橘黄龙病 二、植物脱毒的方法 （一）热处理脱毒 1.原理 利用病毒耐热性差的特点，将植物组织置于高于正常温度的环境中，组织内部的病毒受热以后部分或全部钝化，但寄主植物的组织很少或不会受到伤害。 二、植物脱毒的方法 （一）热处理脱毒 2.方法 温汤浸渍处理 热空气处理 二、植物脱毒的方法 （一）热处理脱毒 3.优点与局限性 优点：对设备要求不高，技术简单，短时间可除去病毒。 局限性：热处理不能脱除所有病毒。 二、植物脱毒的方法 （二）茎尖培养脱毒 1.原理 病毒在感染植株上的分布是不均匀的，即老叶片及成熟的组织和器官中病毒含量较高，而幼嫩的及未成熟的组织和器官中病毒含量较低，生长点（约0.1～1.0mm区域）则几乎不含或含病毒很少。 二、植物脱毒的方法 （二）茎尖培养脱毒 2.过程 二、植物脱毒的方法 （二）茎尖培养脱毒 3.影响茎尖培养的因素 茎尖大小 培养条件 外植体的生理状态 二、植物脱毒的方法 （三）其他脱毒方法 愈伤组织培养脱毒、茎尖微体嫁接脱毒、珠心胚培养脱毒、花药培养脱毒、抗病毒药剂处理脱毒等。 马铃薯茎尖剥离与培养技能实训 一、目的与要求 二、仪器用具与试剂 三、方法与步骤 四、评价与考核 任务实施 掌握马铃薯茎尖剥离的方法，掌握茎尖诱导培养的方法。 一、目的与要求 。 1、仪器用具 2、试剂 3、植物材料 二、仪器用具与试剂 。 1、材料的选择和预处理 选择具有原品种典型特征、病毒危害较轻的健壮植株，采集外植体。根据需要将植株盆栽后进行热处理（这样可以切取较大的茎尖培养）。 三、方法与步骤 。 2、外植体的表面消毒 选取1.5～2cm的顶芽或侧芽为外植体，先用自来水冲洗半小时，用75%的酒精消毒30s，再用2%次氯酸钠溶液处理15min，取出后用无菌水清洗3次，用无菌滤纸吸去多余水分备用。 三、方法与步骤 3、茎尖剥离 在超净工作台上，用解剖针轻轻剥掉幼叶和叶原基，用解剖刀将微茎尖切下来，然后接到培养基中。 三、方法与步骤 4、茎尖培养 用小刀片切下茎尖放入培养基。培养条件为25℃，光照16h，光照强度为2000lx。 三、方法与步骤 马铃薯茎尖剥离与培养技能实训评价与考核标准参照表5-2执行。 四、评价与考核 1.如何进行马铃薯茎段的消毒？ 2.简述马铃薯茎尖剥离的具体操作流程。 任务反思 任务5.2 脱毒苗的病毒检测 任务目标 任务准备 任务实施 任务反思 25 1.了解病毒的指示植物检测法。 2.了解病毒的血清学检测法。 3.了解病毒的电子显微镜检测法。 1.能利用指示植物进行病毒的检测。 2.能利用电子显微镜检测法进行病毒检测。 任务目标 一、直观检测法 二、指示植物检测法 三、血清学检测法 四、电子显微镜检测法 五、分子生物学检测法 任务准备 一、直观检测法 对于非潜隐性病毒，可以直接观察植株茎叶有无这一病毒可见的症状特征，这是一种最简便的方法，然而对于潜隐性病毒就需要更敏感的测定方法。 二、指示植物检测法 （一）检测方法 汁液涂抹法 嫁接法 汁液涂抹法的操作步骤 二、指示植物检测