内容正文:
高二生物导学案
第二章第三节 动物细胞工程及其应用
第3课时 动物细胞融合技术及其应用
【学习目标】
1.阐述动物细胞融合技术的概念、方法、原理
2.利用细胞融合的知识分析单克隆抗体的制备过程、特点
3.通过分析新冠抗原试剂盒检测原理,体会单克隆抗体的应用,并能将所学知识应用于社会生产生活实践,参与社会事件的探讨。
一、动物细胞融合技术
【活动一】自主阅读课本(P66-67),回答下列问题:
1. 概念:在一定条件下将_______或_______动物细胞,通过 、
或 方法,结合形 细胞的技术。
2. 诱导方法: 生物方法___________
化学方法 等
物理方法 等
3. 融合的结果:
4. 完成的标志:
5. 融合的原理:
二、单克隆抗体的制备过程
(一)免疫小鼠
(二)培养骨髓瘤细胞并诱导融合
(三)第一次筛选:
【活动二】根据资料2小组讨论在培养液中添加什么物质可以筛选出杂交瘤细胞,并说明理由。
【资料2】 细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基喋呤(A)阻断,浆细胞有这两种DNA的合成途径,骨髓瘤细胞只有D途径,没有S途径。
(四)第二次筛选:
【活动三】结合稀释涂布平板法和单个菌落的来源,讨论问题 1 和 2
1. 可将含混合杂交瘤细胞的培养液经 处理
加到多孔板中(尽量每个孔最多含 个细胞)
2.【资料3】被荧光素标记的抗原与相应抗体结合后,用紫外线照射,在荧光显微镜下可呈现出荧光(黄绿色等)反应,且与抗原结合的抗体量越多,现象越明显。
思考:(1) 怎样筛选出所需的杂交瘤细胞?原理是什么?
(2) 第二次筛选时,克隆化培养的目的是什么?
三、单克隆抗体应用
1. 诊断疾病:新冠抗原检测试剂盒等
【活动六】请结合图示,小组讨论下列问题。
1、 检测卡上有几种单克隆抗体?
2、 抗体1和T线抗体都与N蛋白结合,是同种抗体吗?
3、 抗体2和C线抗体可发生什么过程?
4、 新冠抗原检测阳性时为什么会出现两条显色带?请描述具体过程。
5、 阴性时为什么会出现一条显色带?C线作用是什么?
6、 请从抗原与抗体特异性结合角度分析,为什么会出现假阳性?请尝试说出一两点。
(
N蛋白
)
(
胶体金标记的结合垫抗体,有两种(抗体1结合N蛋白,抗体2是鸡的I-G-Y抗体)
T线抗体(结合N蛋白)
C线抗体(抗鸡的I-G-Y抗体)
N蛋白
) (
胶体金标记的结合垫抗体(抗体1结合N蛋白,抗体2结合抗鸡的I-G-Y抗体)
) (
N蛋白
) (
T线抗体(结合N蛋白)
) (
C线抗体(结合鸡的I-G-Y抗体)
)
(
胶体金标记的结合垫抗体(抗体1结合N蛋白,抗体2结合抗鸡的I-G-Y抗体)
) (
N蛋白
) (
T线抗体(结合N蛋白)
) (
C线抗体(结合鸡的I-G-Y抗体)
)
注:胶体金是由原料氯金酸和还原剂(如白磷)制备而成,当检测物与胶体金标记的复合物特异性结合后,在可见光的作用下,可通过肉眼观察到显色反应。
(
T线抗体(结合N蛋白)
)2. 治疗疾病:
如安巴韦单抗/罗米司韦单抗联合疗法特效药
小结
(
1
)
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