内容正文:
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3.1重组DNA技术的基本工具学案
学习目标
1. 阐述重组DNA技术所需的三种基本工具的作用
2. 认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新
3. 进行DNA的粗提取与鉴定
基础知识
基因工程的概念
基因工程是指按照人们的愿望,通过 ,赋予 ,创造出更符合人们需要的 。从技术操作层面看,由于基因工程是在 上进行设计和施工的,因此又叫 。
1. 别名:
2. 原理:
3. 操作对象:
4. 操作水平:
5. 结果:
<思考-讨论>基因工程诞生的理论基础
1、不同生物的基因为什么能拼接?
2、外源基因为什么能在受体细胞中表达?
一、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”
1.简称:
2.来源:主要是从 中分离纯化出来的。
3.作用:
4.作用部位:
5.识别序列:大多数限制酶的识别序列由 组成,也有少数限制酶的识别序列由 个、 个或 的核苷酸组成。
6.限制酶的命名:用生物属名的 与种加词的 ,组成了3个字母的略语,以此来表示这个酶是从哪种生物中分离出来的。例如,一种限制酶是从大肠杆菌( Escherichia coli)的R型菌株分离来的,就用字母EcoR表示;如果它是从大肠杆菌R型菌株中分离出来的第一种限制酶,则进一步表示成 。
7.切割结果:DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式——_________和_______
当限制酶在它识别序列的___________将DNA分子的两条链分别切开时,产生的是__________;
当限制酶在它识别序列的_________切开时,产生的是______;
实例1—EcoRⅠ限制酶:
识别序列为 ,
切割部位为 。
形成
实例2——SmaⅠ限制酶:
识别序列为
切割部位为
形成
<练习>写出下列限制酶切割形成的黏性末端
BamHⅠ EcoRⅠ
HindⅢ BglⅡ
<思考讨论>
1.你能根据所掌握的知识,推测限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么吗?
2.试推测限制酶为什么不会切割自身的DNA?
二、分子缝合针—DNA连接酶
1.作用:将 , 被限制酶切开的 。
<DNA连接酶和DNA聚合酶功能比较>
2.分类:
三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”
1.作用:
2.种类:
3.作为载体需具备的条件
(1)
(2)
(3)
4.最常用的运载体——质粒
(1)质粒的化学本质:
质粒是一种____的、结构简单的、独立于______________或_______________之外,并具有自我复制能力的____________分子
(2)基因工程中使用质粒的特点:
在基因工程操作中,真正被用作载体的质粒,都是天然质粒的基础上进行过_________的;这些质粒上常有特殊的标记基因,便于__________________;
<探究实践>
DNA的粗提取与鉴定
1.实验原理:
DNA、RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面存在差异,可以利用这些差异,选用适当的物理或化学方法去除其他成分,对DNA进行提取。
(1)DNA ,但某些蛋白质 。
(2)DNA在 中溶解度不同,能溶于 。
(3)在一定温度下,DNA遇 试剂会呈现 。
二、材料用具
1.选材: