内容正文:
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2.2.1动物细胞培养学案
学习目标
1. 阐明动物细胞培养的条件和过程
2. 简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值
3. 阐明利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体的过程,认同单克隆抗体在临床上有中重要的应用价值
4. 阐明利用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和该技术的应用前景
基础知识
一、动物细胞培养的概念
从动物体中取出相关组织,将它们 ,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞 的技术。
原理:
地位:
二、动物细胞培养的条件
营养条件:
其他条件:
1.
(1)培养基构成:
合成培养基:将细胞所需的 (糖类、氨基酸、无机盐、维生素等)按 严格配制的培养基。
血清等一些天然成分:含有
(2)培养基类型:
2.
①对培养液和所有培养用具进行 处理。
②在 下进行操作
③ :清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
3.
(1)适宜的温度:哺乳动物细胞培养的温度多以___________为宜;
(2)适宜的pH:多数动物细胞生存的适宜pH为________
(3)适宜的渗透压:目的________________________。
4.
(1)气体组成及作用:
(2)具体操作:
通常采用 或 。
置于 中进行培养。
三、动物细胞培养的过程
1.取动物组织
(1)取材:一般取材于 或
(2)取材原因:
2.制成细胞悬液
(1)将组织分散成单个细胞
①方法:
②原因:
Ⅰ.从动物体取出的成块组织中,细胞与细胞靠在一起,彼此
Ⅱ.能使 ,更易进行物质交换。
(2) 用培养液将细胞制成细胞悬液。
<思考讨论>
进行动物细胞培养时常用胰蛋白酶分散细胞,这说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗?
3.原代培养
(1)操作方法:
将 放入培养皿或培养瓶内,置于 中培养。
(2)体外培养的动物细胞类型
① :能够悬浮在培养液中生长增殖。
会因 、 和 等因素而分裂受阻。
② :需要贴附于某些基质表面才能生长增殖( ),大多数细胞属于此类。
除受密度、有害代谢物、营养物质影响外,还会发生 现象。
接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到 时,细胞通常会 。
4.分瓶、进行传代培养
(1)需分瓶进行传代培养的原因:
悬浮培养的细胞会因 、 和 等因素而 ,贴壁细胞在生长增殖时,除受上述因素影响外,还会发生 现象
(2)方法:
①收集细胞
a.悬浮生长类:
b.贴壁生长类:重新用 等处理,使之分散成单个细胞,然后再用 收集
②将收集的细胞制成细胞悬液,分瓶培养
<重要名词解释>
①原代培养:通