内容正文:
1.2 培养液中酵母菌种群数量的变化
第二课时
探究:培养液中酵母菌种群数量的变化
酿酒和做面包都需要酵母菌,这些酵母菌可以用液体培养基(培养液)来培养
培养液中酵母菌种群数量呈“S”形增长。
绘制曲线图,得出结论
一定条件下
培养酵母菌
每隔一天对酵母菌进行计数
一、提出问题:
二、作出假设:
三、探究思路:
培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的?
1、怎么培养酵母菌?需要哪些条件?
2、如何对培养液中的酵母菌进行计数?
3、对酵母菌进行计数时,怎么区分活细胞和死细胞?
4、该实验是否需要设置对照和重复?
思考
问题1:怎么培养酵母菌?需要哪些条件?
10ml土豆培养液
接种酵母菌
恒温培养箱中培养
⑤计数酵母菌数量。
①先将盖玻片放在血细胞计数板的计数室上。
②用吸管吸取培养液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入。
③多余的培养液用滤纸吸去。
④待酵母菌全部沉降到计数室底部,将计数板放在载物台的中央。
操作过程
思考:为什么不能先加培养液再盖盖薄片?
血细胞计数板
①盖玻片可能由于已加入液滴的表面张力而不能严密地盖到计数板表面,使计数室内液体增多,导致结果偏高。
②直接滴加培养液时,在计数室内会产生气泡,导致计数室相对体积减小而造成误差。
问题2:如何对培养液中的酵母菌进行计数?
血细胞计数板
一个大方格 面积为1mm2
6
一个大方格 面积为1mm2
一个大方格
酵母菌培养液的容积为:1mm2X0.1mm = 0. 1mm3=10-4ml
25个中方格×16个小方格
A1
A2
A3
A4
A5
16个中方格×25个小方格
A1
A3
A2
A4
一个大方格
酵母菌培养液的容积为:1mm2X0.1mm = 0. 1mm3=10-4ml
=400个小方格
8
25个中方格×16个小方格
A1
A2
A3
A4
A5
1ml样品中酵母菌数=
A1+A2+A3+A4+A5
5
×25
×10
×1000
×稀释倍数
1个中方格中的平均酵母菌数
1个大方格(0.1mm3)中的酵母菌数
1mm3培养液中酵母菌数
1ml培养液中酵母菌数
抽样检测法
稀释
如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,用无菌水稀释至每个中方格细胞数目为60-100个。
16个中方格×25个小方格
A1
A3
A2
A4
1ml样品中酵母菌数=
抽样检测法
A1+A2+A3+A4
4
×16
×10
×1000
×稀释倍数
1个中方格中的平均酵母菌数
1个大方格(0.1mm3)中的酵母菌数
1mm3培养液中酵母菌数
1ml培养液中酵母菌数
若已知一个小方格内酵母菌数量为A,如何计算1ml样品中酵母菌数=
A
×400
×10
×1000
×稀释倍数
1个小方格中的平均酵母菌数
1个大方格(0.1mm3)中的酵母菌数
1mm3培养液中酵母菌数
1ml培养液中酵母菌数
A1
A3
A2
A4
如图所示是培养液稀释100倍后的镜检结果,如果中方格内的大肠杆菌数刚好是五点取样平均数,则1mL该培养液中大肠杆菌的数量约为 。
16×25×10×1000×100
=400000000=4×108
计上不计下,计左不计右
对于已经出芽的酵母菌,芽体达到母细胞大小一半时,
即可作为两个菌体计算;已死亡的酵母菌不计数。
问题3:对酵母菌进行计数时,怎么区分活细胞和死细胞?
活细胞
死细胞
稀释50倍=1mL培养液+1mL台盼蓝溶液+48mL无菌水
可以用台盼蓝染色法区分活细胞和死细胞,活的酵母菌将呈无色,死的酵母菌将呈蓝色。需要注意的是,加入台盼蓝的体积应该折算在稀释倍数中。
问题4:该实验是否需要设置对照和重复?
本实验有前后对照,可不用另设对照组。
本实验要设置重复,以减少实验误差。比如在对每一天的菌液进行计数时,可以计数3个计数室再求平均值。
思考:从试管中吸出培养液进行计数之前,
建议你将试管轻轻振荡几次。这是为什么?
保证各部位酵母菌的密度相等,若没有摇匀,从底部吸取,计数结果会偏大,从上部吸取,计数结果会偏小。
此外,酵母菌常出现“抱团”现象,因此取样前需要将培养液充分振荡、摇匀,最好用移液器来回吹吸若干次,以确保样品被摇匀。
培养时间/d
酵母菌数量
先增加再降低
酵母菌在开始一段时间呈“J”形增长,但随着时间的推移,由于资源和空间有限,呈“S”形增长,种群数量达到最大值后随着资源的消耗和有害物质的积累,种群数量减少甚至消亡。
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