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第一单元 走近细胞与细胞的分子组成 第2讲 细胞中的无机物、糖类和脂质 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 细胞中的糖类和脂质 细胞中的元素和化合物、无机物 01 02 03 目录 03 考点三 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 [技能要求]尝试用化学试剂检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质的存在。 不同生物组织细胞中各种化合物的含量是有差别的,有的还相差悬殊。 我们的食物来自各种生物组织,我们需要在日常膳食中做到不同食物的合理搭配,以满足机体的营养需要。 那么,怎样检测不同生物组织中的营养物质呢? 探究 实践 1、实验原理 某些化学试剂能够使生物组织中的相关化合物产生特定的颜色反应。 糖类中的还原糖,如葡萄糖,与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀。(将Cu(OH)2中内Cu2+还原成Cu+,从而生成砖红色的Cu2O沉淀) 脂肪可以被苏丹 染液染成橘黄色。 蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。 因此,可以根据有机物与某些化学试剂所产生的颜色反应,检测生物组织中糖类、脂肪或蛋白质的存在。 还原糖+斐林试剂 50 ~65 温水浴 砖红色沉淀 脂肪+ 苏丹 染液 橘黄色 蛋白质+双缩脲试剂 紫色 (1)还原糖的检测和观察 注意: (1)最理想的实验材料是还原糖(葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麦芽糖等)含量较高且颜色较浅的生物组织或器官,如梨、葡萄等;不能选用甜菜、甘蔗、马铃薯块茎,因为甜菜、甘蔗富含的蔗糖不属于还原糖,马铃薯块茎富含的淀粉也不是还原糖;也不能选用西瓜、血液、绿色叶片等,因为这些材料本身的颜色会对实验结果造成干扰。 取材 制备组织样液 显色反应 结论 还原糖含量较高、无色或近于无色的植物组织 制匀浆 纱布过滤 取样液 2mL组织样液 1mL现配斐林试剂 50~65 水浴加热2min 组织样液中有还原糖 浅蓝色 棕色 砖红色 (2)斐林试剂的甲液(质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液),乙液(质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液)要等量混合均匀,现配现用。) 2、操作流程 (2)脂肪的检测和观察 取材 切片 制片 观察 结论 花生种子(浸泡3-4h),去掉种皮 用刀片在花生子叶的横断面上平行切下若干薄片 在低倍镜下找到花生子叶的最薄处,移至视野中央,然后用高倍镜观察 选最薄的切片,用毛笔蘸取放在载玻片中央。 滴:在花生子叶薄片上滴2-3滴苏丹 染液,染色3min。 吸:用吸水纸吸去染液。 滴:滴1-2滴体积分数为50%的酒精,洗去浮色。 吸:用吸水纸吸去酒精。 滴:滴1滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片。 注:若用苏丹 染色剂,则染色时间为1min,染色后观察到红色的脂肪颗粒。 圆形小颗粒呈橘黄色,说明有脂肪存在 2、操作流程 [特别提醒] 染色要求:染色时间不宜过短(染色不充分,脂肪颗粒染色过浅,不宜观察),也不宜过长(时间过长,样品中的脂肪可能溶解,洗浮色时被洗掉,且会使细胞其他部位着色,观察不到被染色的脂肪)。 (3)蛋白质的检测和观察 取材 显色反应 结论 含蛋白质丰富的豆浆或鸡蛋清溶液 组织样液中存在蛋白质 2mL组织样液 1mL双缩脲试剂A液 无色 紫色 4滴双缩脲试剂B液 制备样液 黄豆浆滤液或蛋清稀释液 2、操作流程 [特别提醒] 检测材料的选用:变性的蛋白质也可,或具有两个及两个以上肽键的化合物。 1.蛋白质检测时,为什么先加A液再加B液?B液为什么不能过量? 2.为什么利用斐林试剂的甲液、乙液和蒸馏水也能鉴定蛋白质? [深挖教材] 蛋白质中的肽键在碱性条件下能与Cu2+生成紫色化合物,所以先加A液营造碱性环境,后加B液提供Cu2+。其中双缩脲试剂B液的量不能过多,因为过多的双缩脲试剂B液会与双缩脲试剂A液反应生成Cu(OH)2,使溶液呈蓝色进而掩盖实验生成的紫色。 斐林试剂的甲液、乙液的成分分别与双缩脲试剂的A液、B液相同,只是斐林试剂的乙液的质量浓度比双缩脲试剂的B液大,故只需将斐林试剂乙液用蒸馏水稀释即可。 [深挖教材] 4.脱脂奶粉中不含糖类和脂肪,受到老年人的喜爱,要检验某种脱脂奶粉是否合格,可能用到哪些试剂? 3.现有两瓶没有标记的糖尿病患者(尿液中含有葡萄糖)和肾小球肾炎患者(尿液中含有蛋白质)的尿液样品,如何进行区分? 方法一:用斐林试剂对两瓶尿样进行检测,有砖红色沉淀生成的是糖尿病患者的尿样;没有砖红色沉淀生成的是肾炎患者的尿样。 方法二:用双缩脲试剂来检测,有紫色产生的是肾炎患者的尿样,另一瓶是糖尿病患者的尿样。 符合要求的脱脂奶粉应该无糖和脂肪,同时还应该含有丰富的蛋白质,因此要用斐林试剂、苏丹 (或 )染液和双缩脲试剂来检测。 斐林试剂 双缩脲试剂 不同点 试剂组成 使用方法 反应条件 结果 相同点 甲液:0.1g/mLNaOH 乙液:0.05g/mLCuSO4 A液