限时训练8 基因工程基本操作程序-【名师精选】2024届高考生物一轮复习限时训练

生物限时训练8（基因工程基本操作程序） 班别 姓名 成绩 1．如图是将人的生长激素基因导入细菌细胞 B 内制“工程菌”的示意图。已知细菌细胞 B 内不含质粒A，也不含质粒A 上的基因。下列说法正确的是（    ）    A．将重组质粒导入细菌细胞B常用的方法是农杆菌转化法 B．将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的只是导入了普通质粒的细菌 C．为防止特异性引物的特异性差，PCR获取人生长激素基因设计的特异性引物不宜过长 D．目的基因成功表达的标志是受体细胞中含有人的生长激素基因 2．下列关于基因工程及其应用的叙述正确的是（    ） A．若要生产转基因抗病水稻，可先将目的基因导入大肠杆菌中，再转入水稻细胞 B．用氨基酸序列推测合成的目的基因与原基因的编码区中的外显子一致 C．用PCR技术能检测饮用水中重金属物质的含量 D．作为运载体要有多种限制酶的切点，但对一种限制酶而言，最好只有一个切点 3．科学家通过植物体细胞杂交技术，将易被青枯病菌感染的马铃薯与具有青枯病抗性的红茄进行融合，培育得到一批株系，并利用特异性引物A和B对双亲及培育得到的I～V五个株系进行体外DNA扩增，其中引物A是红茄的6号染色体上青枯病抗性基因的片段，引物B是马铃薯的9号染色体上特有基因的片段。下图是扩增得到的DNA片段进行电泳的实验结果。以下说法错误的是（    ）    A．该株系的培育需要用到原生质体的融合和植物组织培养技术 B．在培育的五个株系中，具有抗青枯病的株系占比为4/5 C．植物体细胞杂交过程中易发生染色体片段丢失，五个株系中丢失片段最多的是Ⅳ D．马铃薯利用引物A扩增也能得到DNA片段，可能因为其基因组中有能与引物A结合的碱基序列，但又不具有完整的青枯病抗性基因 4．下图是通过基因工程获得转基因生物或产品的流程图，下列说法正确的是（    ）    A．若利用图示流程构建工程菌批量生产胰岛素，应先从垂体细胞中获取总RNA B．PCR扩增目的基因时，可在特异性引物3'端添加Nco Ⅰ和Nhe Ⅰ的切割位点 C．制备能分泌人胰岛素的工程菌时，酵母菌比大肠杆菌更适合作为受体细胞 D．图中m为启动子，n为终止子，m是解旋酶的识别和结合的位点 5．原位PCR技术是利用原位PCR仪，在组织或细胞中靶DNA所在的位置上进行的PCR循环扩增，通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。进行扩增时，反应体系中的反应成分需渗透到组织或细胞的靶DNA处才能进行扩增。PCR反应体系中需要添加一定浓度的Mg2+，而组织细胞间的物质会吸附Mg2+，使进入细胞的Mg2+减少。下列说法错误的是（    ） A．原位PCR技术需要从患者细胞中选择耐高温的DNA聚合酶 B．原位PCR反应体系中使用的Mg2+浓度要比常规PCR高 C．反应体系中引物引物中G、C碱基含量越高，其退火温度越低 D．反应体系中子链的合成需要从模板链的5'端向3'端进行延伸 6．下图为“乙肝基因工程疫苗”生产过程图解，质粒上箭头所指部位为相应的限制酶的切割位点。质粒中lacZ基因编码产生的酶可以分解培养基中的X-gal，产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。请回答下列问题：    (1)过程①为了防止目的基因和质粒的自身环化，选用限制酶的最佳方案是___。 A．只有BamHI B．BamHI和EcoRI C．EcoRV和BamHI D．EcoRV和EcoRI (2)限制酶切割后，需要用DNA连接酶连接形成重组DNA分子，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是 。 (3)构建基因表达载体时，一般将目的基因插在启动子和终止子之间。启动子的作用是 。 (4)基因工程的四步程序是目的基因的获取、构建基因表达载体、 和目的基因的检测与鉴定。其中构建基因表达载体时，所用载体除了质粒以外，还有 （答出2点）。 (5)过程②处理大肠杆菌后，大肠杆菌处于 的生理状态。 (6)为了筛选含目的基因表达载体的大肠杆菌，可在培养大肠杆菌的通用培养基中额外加入 ，培养一段时间后挑选出 （填“蓝色”或“白色”）的菌落进一步培养，从而获得大量目的菌。 (7)目的基因导入受体细胞后，常用 技术检测目的基因是否翻译出乙肝病毒外壳。 7．某种病毒可通过其S蛋白和RBD 蛋白与人体细胞表面的受体结合而进入细胞，是宿主抗体的重要作用位点。下图1是科研人员利用该病毒S蛋白基因和RBD 蛋白基因，研制该病毒双抗原疫苗的技术路线。    (1)PCR扩增时，微量离心管中需加入的物质有：模板、特异性引物、原料、 、 。PCR过程需要特异性引物的原因是 ，PCR的最后一个循环结束后通常还需要在