23.2 微生物的选择培养和计数-【大鹏生物】2024高考生物一轮复习讲义

考点二　微生物的选择培养和计数 1．区分选择培养基与鉴别培养基 种类 特点 用途 举例 选择培养基 允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长 从众多微生物中分离所需的微生物 加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌 鉴别培养基 根据微生物的代谢特点在培养基中加入某种指示剂或化学药品，进而产生特定的颜色或其他变化 鉴别不同种类的微生物 用伊红—亚甲蓝培养基鉴别大肠杆菌 提醒　常见选择培养基举例：①缺少氮源的培养基可以筛选能利用大气中N2的微生物。②含青霉素的培养基可淘汰细菌，筛选出真菌。③无有机碳源的培养基可筛选出自养微生物。 2．微生物的选择培养和数量测定 (1)稀释涂布平板法步骤 ①系列稀释操作：该操作常用在将细胞接种到培养基之前，通过液体稀释的方法分散细胞，随着稀释程度的增大，单位体积中的微生物细胞数量减少，细胞得以分散。 操作步骤： ②涂布平板操作步骤 (2)微生物的数量测定方法 ①显微镜直接计数法 ②间接计数法——活菌计数法(即稀释涂布平板法) 原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 根据图示问答以下问题： Ⅰ.为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。 Ⅱ.为什么用此种方法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目低？ 提示　因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 Ⅲ.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234个(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)，那么稀释倍数为106的试管中细菌的浓度是2.34×103个/mL，稀释倍数为10的锥形瓶中细菌的浓度为2.34×108个/mL，所以每克样品中的细菌数是2.34×109个。 3．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的实验操作 (1)实验原理 (2)实验流程 (3)实验结果分析与评价 选择性必修3 P19“探究·实践”：本活动初步筛选了能分解尿素的细菌，请进一步借助于生物化学的方法来鉴定所分离的菌种：分解尿素的细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，在培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该细菌能够分解尿素。 归纳总结　两种纯化方法的比较 项目 平板划线法 稀释涂布平板法 分离结果 关键操作 接种环在固体培养基表面连续划线 ①一系列的梯度稀释；②涂布平板操作 接种用具 接种环 涂布器 优点 可以观察菌落特征，对混合菌进行分离 可以计数，可以观察菌落特征 缺点 不能计数 操作复杂，需要涂布多个平板 共同点 都要用到固体培养基；都需进行无菌操作；都会在培养基表面形成单个的菌落；都可用于观察菌落特征 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$