内容正文:
基因工程的基本工具与操作程序练习
一、选择题
1.图甲、乙中的箭头表示三种限制性内切核酸酶的酶切位点, 表示氨苄青霉素抗性基因, 表示新霉素抗性基因。下列叙述错误的是( )
A. 在构建重组质粒时,可用 和 切割质粒和外源DNA
B. 在酶切过程中,不能破坏质粒中全部的标记基因
C. 若只用 处理质粒和外源DNA分子片段,无法避免自身环化和反向连接
D. 导入重组质粒的大肠杆菌可以在含氨苄青霉素的培养基中生长
2.某实验利用PCR技术获取目的基因,实验结果显示除目的基因条带(引物与模板完全配对)外,还有2条非特异条带(引物和模板不完全配对)。为了减少反应中非特异条带的产生,以下措施中有效的是( )
A. 增加模板DNA的量 B. 延长热变性的时间
C. 延长延伸的时间 D. 提高复性的温度
3.自然界中很少出现蓝色的花,天然蓝色花产生的主要原因是花瓣细胞液泡中花青素在碱性条件下显蓝色。我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基因 及其激活基因 构建基因表达载体(如图),通过农杆菌转化法导入白玫瑰中,在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝。下列叙述错误的是( )
A. 上述获得蓝色玫瑰的方案中需要转入能调控液泡 的基因
B. 将 基因插入 质粒时宜使用的限制酶是 和
C. 和 基因具有各自的启动子,前者调控后者的表达
D. 农杆菌可将 质粒上的 整合到白玫瑰染色体DNA上
4.关于“DNA的粗提取与鉴定”实验,下列说法错误的是( )
A. 过滤液沉淀过程在 冰箱中进行是为了防止DNA降解
B. 离心研磨液是为了加速DNA的沉淀
C. 在一定温度下,DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色
D. 粗提取的DNA中可能含有蛋白质
5.正常情况下, 基因只在胎盘组织和脑组织中表达,为了探究 基因在肝癌细胞中的表达情况,实验小组分别提取肝癌组织和正常组织细胞的RNA,以RNA为模板指导合成单链 ,再将获得的 进行电泳,电泳结果如表所示。下列相关叙述正确的是( )
表达 基因样本
正常肝组织样本
肝癌样本1
肝癌样本2
肝癌样本3
A. 以RNA为模板合成 时需要加入RNA聚合酶
B. 以RNA为模板合成的 中的嘌呤数目和嘧啶数目相等
C. 基因的表达情况可作为肝细胞是否癌变的检测依据
D. 该实验也可以直接提取肝组织细胞中的DNA后再进行电泳
6.抗虫和耐除草剂玉米双抗12-5是我国自主研发的转基因品种。为给监管转基因生物安全提供依据,采用PCR方法进行目的基因监测,反应程序如图所示。下列叙述正确的是( )
A. 预变性过程可促进模板DNA边解旋边复制
B. 后延伸过程可使目的基因的扩增更加充分
C. 延伸过程无需引物参与即可完成半保留复制
D. 转基因品种经检测含有目的基因后即可上市
7.粗提取DNA时,向鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水并搅拌,过滤后所得滤液进行下列处理后再进行过滤,在得到的滤液中加入特定试剂后容易提取出DNA相对含量较高的白色丝状物的处理方式是( )
A. 加入适量的木瓜蛋白酶
B. 的水浴箱中保温10~15分钟
C. 加入与滤液体积相等的、体积分数为 的冷却的酒精
D. 加入 调节浓度至 过滤→调节滤液中 浓度至
二、非选择题
8.用DNA重组技术可以赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人类需要的生物产品。在此过程中需要使用多种工具酶,其中4种限制性内切核酸酶的切割位点如图所示。
回答下列问题:
(1) 常用的DNA连接酶有 连接酶和 连接酶。图中 酶切割后的DNA片段可以用 连接酶连接。图中 酶切割后的DNA片段可以用 连接酶连接。
(2) DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是 。
(3) DNA重组技术中所用的质粒载体具有一些特征。如质粒DNA分子上有复制原点,可以保证质粒在受体细胞中能 ;质粒DNA分子上有 ,便于外源DNA插入;质粒DNA分子上有标记基因(如某种抗生素抗性基因),利用抗生素可筛选出含质粒载体的宿主细胞,方法是 。
(4) 表达载体含有启动子,启动子是指 。
9.如图为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图,据图回答下列问题。
(1) 和质粒的本质相同,都是 ,二者还具有其他共同点,如 (写出一条即可)。
(2) 若质粒的切割末端为,则与之连接的目的基因切割末端应为;可使用 把质粒和目的基因连接在一起。
(3) 氨苄青霉素抗性基因在质粒DNA上作为 ,其作用是 。
(4) 下列常在基因工程中作为载体的是( )
A. 苏云金杆菌抗虫