内容正文:
第40讲 动物细胞工程
1.阐明动物细胞培养是从动物体获得相关组织,分散成单个细胞后,在适宜培养条件下让细胞生长和增殖的过程。动物细胞培养是动物细胞工程的基础。2.阐明动物细胞核移植一般是将体细胞核移入一个去核的卵母细胞中,并使重组细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的过程。3.阐明动物细胞融合是指通过物理、化学或生物学等手段,使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。4.概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术。5.简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。
考点一 动物细胞培养
1.动物细胞培养的概念:从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。
2.动物细胞培养的条件
3.动物细胞培养的过程
概念辨析 细胞贴壁和接触抑制
细胞贴壁是指体外培养的细胞贴附在瓶壁生长的现象;接触抑制是指当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞通常会停止分裂增殖的现象。
4.干细胞培养及其应用
种类
胚胎干细胞
成体干细胞
诱导多能干细胞
来源
早期胚胎
骨髓、脐带血和外周血
体细胞(如成纤维细胞等)
特点
能分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞,并进一步形成机体的组织和器官甚至个体
分化成特定的细胞或组织
能诱导分化成类似胚胎干细胞的细胞
应用
分化成心肌细胞、神经元和造血干细胞等
造血干细胞用于治疗白血病;神经干细胞用于治疗帕金森病、阿尔茨海默病等
治疗小鼠的镰状细胞贫血、阿尔茨海默病、心血管疾病等
1. 实验动物细胞培养的基本过程如下图所示,下列叙述正确的是( )
A. 应选择幼龄动物的皮肤组织进行动物细胞培养
B. 甲过程需要用纤维素酶和果胶酶处理
C. 丙过程是传代培养,细胞都不能保持二倍体核型
D. 乙过程是原代培养,一般不会出现接触抑制现象
2. 为研究小鼠皮肤愈合机理,现将小鼠皮肤进行分离培养,过程如图所示,请回答有关问题:
(1)在对小鼠皮肤组织进行培养过程中,过程甲中要对实验小鼠进行______________处理,过程乙必须用____________处理。
(2)体外培养动物细胞时,通常要加入_________等天然成分,为防止细菌感染,培养液中应添加______,且还要置于含5%CO2气体环境中,CO2的作用是________________。
(3)丁过程属于__________。在机体内,皮肤干细胞分化成皮肤是机体细胞中________________的结果。
归纳比较植物组织培养与动物细胞培养
比较项目
植物组织培养
动物细胞培养
理论基础
植物细胞全能性
细胞增殖
培
养
基
类型
固体或半固体培养基
液体培养基
成分
水、矿质元素、维生素、蔗糖、氨基酸、琼脂
葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子、动物血清等
取材
植物幼嫩部位或花药等
动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织
关键环节
细胞的脱分化和再分化
细胞增殖和癌变
结果
新的组织或植株个体,可以体现全能性
新的细胞系或细胞株,不形成个体,不体现全能性
应用
①植株快速繁殖
②脱毒植株的培育
③制备人工种子
④生产药物、杀虫剂等
⑤转基因植物的培育
①蛋白质生物制品的生产
②皮肤移植材料的培育
③检测有毒物质
④生理、病理、药理学研究
相同点
①两技术手段培养过程中细胞都进行有丝分裂,都是无性繁殖,都可称克隆,都不涉及减数分裂
②均为无菌操作,需要适宜的温度、pH等条件
[易错提醒]
有关植物组织培养与动物细胞培养的三点提醒
(1)植物组织培养过程中存在脱分化和再分化,而动物细胞培养过程中没有脱分化和再分化过程。
(2)植物组织培养可获得新个体,体现了细胞全能性,而动物细胞培养只能得到细胞,没有体现细胞的全能性。
(3)两种技术手段培养过程中都进行有丝分裂,不涉及减数分裂。
考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体
(一)动物细胞融合技术
1.概念:使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。
2.结果:形成杂交细胞,且具有原来两个或多个细胞的遗传信息。
3.诱导方法:PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。
4.意义:突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能。
5.应用
(1)是研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。
(2)杂交瘤技术为制造单克隆抗体开辟了新途径。
(二)单克隆抗体及其应用
1.单克隆抗体的制备
(1)制备原理
①B淋巴细胞特点:一种B淋巴细胞只分泌种特异性抗体。
②骨髓瘤细胞特点:能在体外大量增殖。
③杂交瘤细胞的特点:既能大量增殖,又能产生足够数量的特定抗体。
(2)制备过程
2. 单克隆抗体的应用
(1)作诊断试剂,在多种疾病