2.2.1动物细胞培养 新教材课件-2022-2023学年高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

克隆猴：中中和华华 克隆皮肤 单克隆抗体 第2节 动物细胞工程 动物细胞工程常用的技术有哪些？ 动物细胞工程常用的技术动物细胞培养、动物细胞融合、动物细胞核移植、生产单克隆抗体，其中动物细胞培养是最基础的技术。 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 第2节　动物细胞培养 一 动物细胞培养 从社会中来 在治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，而且会产生免疫排斥反应。那么，怎样才能获得大量的自体健康皮肤？能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤？ 通过细胞培养构建的人造皮肤 可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增； 目前，科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养，以获得适合临床上使用的人造皮肤； 一、动物细胞培养 1、概念： 从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 2、目的： 获得细胞或细胞产物；不能获得完整动物个体。 3、原理： 细胞增殖（有丝分裂） 4、培养对象： 胚胎或幼龄动物的细胞较成体的细胞更易培养 动物细胞培养需要哪些条件？ 动物细胞培养的基本操作过程是怎样的？ 5 动物细胞培养的条件 营养条件 其他条件 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 糖类、氨基酸、无机盐、维生素等 二、动物细胞培养的条件 二、动物细胞培养的条件 1.营养条件: 将细胞所需的营养物质按_____________严格配制而成。 (2)天然成分:_____等。 (3)一般使用_____培养基,即培养液。 种类和所需量 血清 液体 营养物质主要包括：糖类、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子、微量元素等。 为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？ 人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，血清中含人类未知、细胞生长增殖所必需的物质。 （注意：这里的糖类不能是淀粉） 培养皿 培养瓶 (1)合成培养基: 2.无菌、无毒的环境: (1)培养液和培养用具_____处理。 (2)_____环境下操作。 (3)培养液定期更换的原因:__________________________________________ 3.温度、pH和渗透压: (1)适宜的温度:哺乳动物多以__________ ℃为宜。 (2)适宜的pH:多数细胞生存的适宜pH为_________。 (3)适宜的渗透压。 4.气体环境:95%空气和5%CO2的CO2培养箱中。 (1)O2作用:_________________。 (2)CO2的主要作用:_______________。 36.5±0.5 7.2～7.4 细胞代谢所必需的 维持培养液的pH 清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害 无菌 灭菌 CO2培养箱 加抗生素 取动物组织（动物胚胎或幼龄动物） 用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理 单个细胞 加培养液 细胞悬液 原代培养（10代以内） 在培养皿或培养瓶中 传代培养（10代以后） 悬浮培养的细胞直接用离心法收集；贴壁细胞需用胰蛋白酶处理分散成单个细胞后，在离心法收集 三、动物细胞培养的过程 （1）选材： ；原因是： 。 细胞分化程度低，分裂能力强，容易培养 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 （2）培养前为什么分散成单个细胞？ ①成块组织中细胞与细胞靠在一 起，彼此限制了生长与增殖； ②利于与培养液充分接触，保证 O2与营养供应和代谢物及时排出。 （3）用胰蛋白酶分散细胞，可以说明什么问题？ 。 胃蛋白酶可以吗？理由。 动物细胞间的物质主要是蛋白质 胃蛋白酶不可以，pH不适宜 胃蛋白酶作用的适宜pH约为1.5，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性，多数动物细胞培养的适宜pH为7.2-7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性。 (4)酶解法较温和，一定不会对动物细胞造成损伤，对吗？ 不对；使用胰蛋白酶时，要控制好作用时间，因为胰蛋白酶不仅能分解细胞间的蛋白质，长时间作用还会分解细胞膜蛋白等，对细胞造成损伤。 纤维蛋白、胶原蛋白等 （5）体外培养的动物生长类型 ①悬浮生长类： 能够悬浮在培养液中生长增殖。 会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。 ②贴壁生长类： ______体外培养的细胞需要___________________