内容正文:
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高中知识点考点全频累积 生物学
第2节 微生物的培养技术及应用
第1课时 微生物的基本培养技术
知识梳理·探究笔记 解决基本知识问题
知识点1 培养基
1. 概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁
殖的营养基质。
2. 种类(按物理性质分)
液体培养基
加入凝固剂,常用琼脂
固体培养基(琼脂不提供碳源、氮源)
3. 营养构成:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,此外
还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。
知识点2 无菌技术
获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。无菌技术主要包括
消毒和灭菌。二者的区别如下表所示。
项目 消毒 灭菌
概念
使用较为温和的物理、化学或生物等方
法杀死物体表面或内部一部分微生物
使用强烈的理化方法杀死物体内外所
有的微生物,包括芽孢和孢子
适用对象 操作空间、操作者的衣着和手等
微生物培养的器皿、接种用具和培养
基等
常用方法
煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药物消
毒法和紫外线消毒法
湿热灭菌(其中高压蒸汽灭菌的效果
最好)、干热灭菌、灼烧灭菌
知识点3 微生物的纯培养
纯培养的原理
由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物,获得纯培养物的过
程就是纯培养
纯培养方法 平板划线法和稀释涂布平板法
纯培养过程
① 制备培养基 配制培养基→灭菌→倒平板
② 接种和分离酵母菌 用平板划线法在马铃薯培养基表面接种酵母菌
③ 培养酵母菌
待菌液被培养基吸收,将接种后的平板和一个
未接种的平板倒置,放入28 ℃左右的恒温箱中
培养24~48 h
扩大培养获得大量
菌种时常用液体培养基
部分微生物仍可存活
这是研究和应用微生
物的前提,也是发酵工程
的基础
体积分数为70%~75%的酒
精消毒效果最好
用酒精灯外焰
分散的微生物在适
宜的固体培养基表面或内
部可以繁殖形成肉眼可见
的、有一定形态结构的子
细胞群体,即菌落 灭菌前要调节pH
按无菌操作技术要求
将目的微生物移接到培养
基质中的过程
检测平板是否被杂菌污染
如谷氨酸棒状杆菌是好氧菌,乳酸菌是厌氧菌
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选择性必修 3 第 1 章 发酵工程
考向突破·指点迷津 解决考试能力问题
考向1 培养基的成分、功能及来源分析
【考向剖析】
营养要素 功能 来源
碳源
① 构成细胞物质和一些代谢物
② 有机碳既是碳源又是能源
无机碳源:NaHCO3等
有机碳源:糖类、脂质、蛋白质等
氮源
合成蛋白质、核酸(由C、H、O、N、P 元素
构成)以及含氮的代谢物
无机氮源:铵盐、硝酸盐等
有机氮源:牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基
酸等
生长因子 酶和核酸的组成成分 维生素、氨基酸、碱基
水
不仅是优良的溶剂,而且可维持生物大分子结
构的稳定
外界摄入
无机盐 为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素 无机物
碳是生命元素
如蔗糖
CO2是自养型微生物的碳源
由C、H、O、N 等元素构成
既是碳源,也是氮源
蛋白质、核酸、多糖等是生物大分子
【典例1】(2022·山东省淄博市模拟)如表是微生物培养基的成
分。下列有关说法错误的是( )
编号 ① ② ③ ④ ⑤
成分 (NH4)2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O
含量 0.4 g 4.0 g 0.5 g 0.5 g 100 mL
A. 此培养基可用来培养自养型微生物
B. 此表中的营养成分共有三类,即水、无机盐、氮源
C. 若除去①,此培养基可培养圆褐固氮菌
D. 培养基中若加入氨基酸,则它可充当碳源、氮源
【名师点睛】有关培养基
营养物质的三点提醒
(1)培养不同的微生物
所需要的营养物质可能不
同。
① 自养型微生物的培养
基以无机营养为主。
② 异养型微生物的培养
基以有机营养为主。
(2)微生物需要补充生
长因子,是由于缺乏合成这
些物质所需要的酶或合成能
力有限。
(3)微生物需要量最大
的是碳源,能合成含碳有机
物的是自养型,反之则为异
养型。
无机氮源
含量最多
培养基中无有机碳源,故以CO2为碳源,培养对象为自养型
异养型生物,以氮气为氮源,但需要有机碳源
构成蛋白质的基本单位,由C、H、O、N等元素构成
考向2 酵母菌的纯培养
【考向剖析】
1. 平板划线法接种和分离酵母菌
(1)平板划线法:通过接种环在固体培养基表面连续划线操作,将聚集的菌种逐步稀释
分散到培养基表面。
(2)平板划线法的注意事项
① 灼烧接种环后,要冷却后才能进行操作,以免温度太高杀死菌种。
② 第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始,能使微生物的数目随着划线
次数的增加而逐渐减少,最终得到由单个细胞繁殖而来的菌落。
③ 划线用力大小要适当,防止用力过大将培养基划破。
④ 最后一次的划线不要与第一次的划线相连。
目的是出现