微点微练76 基因工程的技术支撑——PCR及应用-【新高考方案·微积分】2024版高考生物一轮总复习

命题板块十 生物技术与工程 微点微练 一天一点 76基因工程的技术支撑 PCR及应用 题点考法— 全练过 关键能力—一点通 1.PCR反应中使用的引物的3'端为结合模板DNA的关键碱：1.归纳PCR技术及其应用 基，而5'端则无严格限制，常用于给目的基因两侧添加限制(1)原理与条件 酶切点等序列，如图。下列相关叙述正确的是 mm2pmmm 原理DNA半保留复制 5' 51 mlllmmmmmm 条件厂 模板DNA、引物、4种脱氧核台酸、 A.PCR第3个循环，消耗了7对引物 耐高温的DNA聚合酶 B.反应体系中游离的脱氧核苷酸作为PCR扩增的原料会：(2)引物与DNA扩增方向 依次连接到引物的5'端 作用使DNA浆合酶能够从引物的 C.耐高温的Tag DNA聚合酶能将单个脱氧核苷酸结合到 3′端开始连接悦氧核苷酸 双链DNA片段的引物链上 D.用图中引物扩增仅需两个循环后就能获得两端均添加限 实质 是一小段能与DNA母链的一 段碱基序列五补配对的短单储 制酶切点的目的基因 核酸 2.(2023·南通模拟)如图表示 mgnmmm 物 利用PCR技术扩增目的基 。变性 种类每一个DNA分子复制需2种 引物（除含母键DNA的分子） 因的部分过程，其原理与细 第轮 ↓复性 胞内DNA复制类似。下列 循环 物》引物片 盘进复制次，需婴写引物数为22 叙述错误的是 () 是伸 扩增 DNA的合成方向总是从千链的5' A.耐高温的DNA聚合酶 MMmmmmmmmmmmmmmmnnmn Smmmm 方向 端向3'端延伸 总将游离的脱氧核苷酸 连接到3'揣 (3)扩增进程 B.在第三轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的 变性 当温度超过90℃时，双链DNA解 DNA片段 粢为单能 C.引物之间或引物自身发生碱基互补配对，则不能有效扩增目 温度下降到50℃左右时，两种引 的基因 复性 物通过碱基互补配对与两条单链 D.从理论上推测，第五轮循环产物中含有引物A的DNA片段 DNA结合 占15/16 当温度上升到72℃左右时，时高福 3.下列关于DNA片段的扩增及电泳鉴定原理的说法，正确的 延伸 的DNA聚合酶从引物起始进行互 是 补链的合成（从5'端向3'端延伸） A.在一定的pH条件下DNA分子可带上正电荷或负电荷 B.带电DNA分子在电场的作用下会向着与它所带电荷相同的 (4)应用 电极移动 ①选择性扩增目的基因，通过设置特定引物可 C.DNA分子在凝胶中的迁移速率与DNA分子大小、构象 选择性扩增所需基因。 等有关，与凝胶等无关 ②在目的基因两端加入特定的限制酶核酸 D.凝胶中的DNA分子直接可以在波长为3O0m的紫外灯下 序列 被检测 ③检测目的基因是否导人受体细胞。 4.为评估外源基因Vgb在菊花中的稳定性以及对生态环境的 ④蛋白质工程中用于定点突变改造基因 影响，研究人员在种植转基因菊花的第二年，随机选取转基 ⑤利用RT-PCR技术进行病毒核酸检测。 因菊花株系及周边非转基因菊花和各种杂草，提取DNA 根据Vgb设计特异性引物进行PCR扩增，电泳结果如图。 下列说法不正确的是 MCK12345678g1011123141516718192别 460bp 注：CK表示质粒阳性对照，】为空白对照，2一10为转基因林 系，11~15为不同种类杂草，16~20为非转基因菊花。 151 新高考方案“微”积分生物学 A,设置空白实验是为了排除实验操作、试剂污染等对结果： 的影响 B.结果表明2年内Vgb基因在菊花细胞中稳定，且未发生 向周边植物的扩散 C.转基因植物与周边其他植物之间不可能通过花粉发生基 因交流 D.将Vgb基因转人其他植物时同样要经过安全性评价 5.实时荧光定量PCR简称qPCR,灵敏度高，特异性好，是目 前检测微小残留病变的常用方法。将荧光标记的Taqman :2.PCR技术中与引物相关的问题归纳 探针与待测样本DNA混合，当探针完整时，不产生荧光。 :(1)PCR技术需要引物的原因 在PCR过程中，与目的基因结合的探针被Taq DNA聚合 DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从 酶水解，R与Q分离后，R发出的荧光可被检测到在特定光： 3'端延仲IDNA链，因此，DNA的复制需要引 激发下发出荧光（如图1所示），随着循环次数的增加，荧光 物，当引物与DNA母链通过碱基互补配对结 信号强度增加，通过实时检测荧光信号强度，可得C1值（该： 合后，DNA聚合酶就能从引物的3端开始延伸 值与待测样本中目的基因的个数呈负相关)，如图2。下列 DNA链，因此DNA的合成方向总是从子链的 相关叙述错误的是 5'端向3'端延伸。 1200 6 gT5T5' 3 引物2 引物I r制 ◆ 3 引物I Q 5'mt 3 工g 引物Ⅱ 引